芸香苷诱导K562细胞凋亡机制

• 作者: 呼文亮 王玮 王瑞珉 陈立军 陈虹 靳秋月
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 芸香苷 caspase-3 细胞凋亡 细胞色素C
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 738-741
• 页数: 4页
• 分类号: R285.5
• 字数: 3803字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-2670.2006.05.038

摘要

目的研究芸香苷诱导白血病K562细胞凋亡过程中caspase-3基因及细胞色素C的表达.方法体外培养白血病K562细胞,MTT法观察细胞毒作用,测定IC50,Hoechst 33342/PI双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞周期,TRIZOL试剂提取K562细胞RNA,核酸定量仪检测纯度,RT-PCR扩增,紫外透射检测扩增产物,扩增产物测序,观察caspase-3的表达,4×10-5mol/L药物处理细胞后,分离细胞线粒体和胞浆,经SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western blotting检测线粒体、细胞浆细胞色素C表达.结果芸香苷浓度为2×10-5、4×10-5、8×10-5 mol/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;不同浓度芸香苷处理K562细胞44 h后,应用MTT比色法计算ICs0为4×10-5mol/L;4×10-5mol/L芸香苷处理细胞24 h后,Hoechest 33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞凋亡表现;流式细胞仪检测芸香苷处理后G2期细胞显著增多(64.7%),DNA合成受抑,凋亡率增加;PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳,紫外透射仪下明显观察到500 bp条带,产物经过序列测定证实芸香苷处理细胞诱导caspase-3基因的表达Western Blotting检测线粒体细胞色素C表达水平下调,细胞浆出现明显细胞色素C蛋白条带.结论芸香苷诱导K562细胞caspase-3基因表达,细胞色素C通过线粒体膜进入胞浆,导致细胞线粒体功能异常,细胞发生凋亡,线粒体途径诱导白血病细胞凋亡是其作用机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈虹	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	62	370	10.0	17.0
2	王瑞珉	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	6	84	4.0	6.0
3	陈立军	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	47	266	10.0	14.0
4	靳秋月	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	17	166	8.0	12.0
5	王玮	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	36	117	7.0	10.0
6	呼文亮	中国人民武装警察部队医学院生化教研室	20	315	10.0	17.0