食管癌细胞株热休克蛋白70肽复合物的提纯及抗肿瘤活性观察

• 作者: 刘光辉 周娟 孙战强 李永欣 李静静 祁元明
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 食管肿瘤 热休克蛋白质70 分离与提纯 T淋巴细胞,细胞毒性
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 480-483
• 页数: 4页
• 分类号: R735.1
• 字数: 2391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.03.031

摘要

目的:利用抗体亲和层析法从食管癌细胞内提纯热休克蛋白70肽复合物(heat shock protein70 peptidecomplexes,HSP70-PCs),观察其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对食管癌细胞的杀伤作用.方法:常规方法造成EC-109细胞热休克,偶联HSP70抗体的CNBr-Sepharose 4B亲和层析柱分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot检测获得的蛋白;混合淋巴细胞反应检测纯化过程中收集的蛋白粗提液、PBS洗脱蛋白及解吸附剂洗脱蛋白对食管癌细胞的杀伤活性.结果:细胞经热休克作用,裂解后获蛋白粗提液,经亲和层析柱过柱、洗脱后得到的蛋白经电泳鉴定为相对分子质量在70 000左右的单一条带,且经Western blot鉴定可与HSP70单克隆抗体结合,证实为HSP70;MTT法检测解吸附剂洗脱蛋白诱导的CTL对食管癌细胞的杀伤率为(38.10±2.78)%,明显高于蛋白粗提液(22.22±2.54)%和PBS洗脱蛋白(17.46±3.89)%,P均＜0.05.结论:利用抗体亲和层析法,能够简便地从热休克处理过的食管癌细胞株中分离纯化HSP70-PCs,且所获得的HSP70-PCs具有较强的激活CTL杀伤食管癌细胞的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祁元明	郑州大学生物工程系	49	132	7.0	9.0
2	孙战强	郑州大学生物工程系	3	3	1.0	1.0
3	李永欣	郑州大学生物工程系	15	18	2.0	2.0
4	刘光辉	郑州大学第一附属医院小儿外科	13	16	3.0	3.0
5	李静静	郑州大学生物工程系	6	5	1.0	1.0
6	周娟	郑州大学生物工程系	1	1	1.0	1.0