糖尿病大鼠肾小球细胞中p27蛋白的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

• 作者: 何晓峰 刘晓城 邵菊芳
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病肾病 基因,抑制,肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（20）
• 所属期刊栏目: 糖尿病康复相关基础研究
• 页码范围: 187-189
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 2567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.20.036

摘要

背景:P27是近年来在肾脏疾病研究中受到广泛关注的一种细胞周期激酶抑制剂,它通过影响细胞周期这一细胞生命活动的基本过程来调节细胞的生长.已证实p27蛋白对肾脏细胞增殖、肥大、分化、凋亡等多种生长反应均具有重要的调控作用.目的:探讨肾组织p27蛋白的表达与糖尿病肾病细胞增殖、凋亡之间的相互关系.设计:完全随机分组设计,对照动物实验.单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院肾病实验室.材料:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院内科肾病实验室及同济医学院超微病理中心完成.选用清洁级成年雄性SD大鼠48只,随机将大鼠分为2组:实验组和对照组,每组24只.方法:①建立糖尿病模型:实验组按60 mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型.48 h后,测定血糖和尿糖.将实验组随机血糖≥16.7 mmol/L且尿糖为()～()()者视为模型成功.②模型成功后第3,7,14,28天分别处死实验组和对照组动物各6只.处死前测定血肌酐、尿肌酐,计算内生肌酐清除率;用ELISA法测定尿视黄醇结合蛋白;作十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析尿蛋白.③肾组织切片,光镜下观察病理学改变.部分皮质作超微结构检查.④用免疫组化染色法检测肾组织切片p27及增殖细胞核抗原蛋白的表达;原位末端标记法检测细胞凋亡.分别用肾小球p27、增殖细胞核抗原、原位末端标记法阳性细胞数/肾小球细胞总数表示肾小球p27、增殖细胞核抗原表达的阳性率及凋亡率.⑤组间差异用未配对资料t检验,数据间相关性处理采用Spearman相关分析.主要观察指标:实验组大鼠造模后第3,7,14,28天肾功能,尿蛋白,肾小球细胞p27,增殖细胞核抗原表达阳性率和凋亡率与对照组比较结果.结果:大鼠48只均进入结果分析.①病理学改变:造模后第7天,光镜下开始出现肾小球直径增大,电镜下开始出现脏层上皮细胞足突融合;第14天时电镜下出现肾小球系膜区轻度节段性增宽;第28天时光镜下始见肾小球系膜区轻度节段性增宽.②实验组造模后第7,14,28天内生肌酐清除率及尿视黄醇结合蛋白水平明显高于对照组(t=2.143～3.004,P＜0.05).尿圆盘电泳提示,从第3天起,每组均有部分标本出现中、低分子蛋白.③实验组造模后第3天大鼠肾小球细胞p27蛋白的表达阳性率明显低于对照组(t=2.536,P＜0.05),第7,14,28天表达阳性率依次增加,明显高于对照组(t=2.704～2.823,P＜0.05).实验组造模后第3天大鼠肾小球增殖细胞核抗原的表达阳性率最高,第7,14天表达依次减少,但仍明显高于对照组(t=2.681,2.525,P＜0.05),造模后第28天与对照组比较,差异不明显.造模后第3天大鼠肾小球细胞凋亡率明显高于对照组(t=2.764,P＜0.05),第7,14,28天大鼠肾小球细胞凋亡率均明显低于对照组(t=2.096～2.627,P＜0.05).④肾小球p27蛋白表达阳性率与肾小球增殖细胞核抗原表达阳性率呈显著负相关(r=-0.446,P＜0.05),与凋亡率呈显著负相关(r=-0.517,P＜0.05). 结论:糖尿病早期肾近曲小管损害引起的重吸收功能障碍和肾小球的高滤过基本同步发生.p27蛋白在糖尿病早期可能通过抑制肾脏细胞增殖和凋亡而参与糖尿病肾病的发生、发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓城	华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科	114	834	15.0	22.0
2	何晓峰	华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科	61	403	11.0	16.0
3	邵菊芳	华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科	40	189	9.0	12.0