乙型肝炎病毒核心抗原肝细胞结合新蛋白的功能研究

• 作者: 刘妍 张玲霞 成军 李克 杨永平 王琳 陆荫英
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 酵母双杂交技术 基因芯片技术 MTT代谢实验
• 年，卷（期）: 2006,（13）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1413-1416
• 页数: 4页
• 分类号: R341|R373.21|R394
• 字数: 4003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.13.015

摘要

目的为探讨乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)在乙型肝炎发病机制中的作用,筛选、克隆出人肝细胞中与HBcAg相互作用的未知蛋白基因C12并进一步对其功能作初步研究.方法应用酵母双杂交系统-3筛选到与肝细胞蛋白结合的蛋白编码基因C12,克隆该基因并用再次用重回交实验证实作用可靠后,将基因与荧光蛋白基因融合表达,分析该基因表达产物在哺乳动物细胞中的定位;用MTT代谢实验了解C12表达对哺乳动物细胞生长代谢的影响作用;酵母双杂交实验寻找肝细胞中与之相互作用的蛋白;基因芯片技术了解C12基因表达对其他基因表达的影响.结果成功地筛选并克隆出HBcAg的肝细胞结合蛋白C12基因,经回交实验再次证实C12基因的表达产物C12蛋白与HBcAg确切的结合作用.该基因与荧光蛋白基因融合表达转染293细胞、L02细胞后48 h细胞呈现均匀分布的强绿色荧光信号,提示C12蛋白可能主要定位在细胞质内;通过在Bel7402、L02细胞系中进行MTT检测,发现C12在上述细胞中表达没有对细胞的生长繁殖产生明显影响;用酵母双杂交系统-3筛选出肝细胞中与C12蛋白相互作用的蛋白基因16种;基因芯片技术在1 152个基因中筛选出17个差异表达的基因.结论 C12蛋白主要定位在细胞质内,对哺乳动物细胞生长繁殖无明显影响,能与肝细胞中多种蛋白结合,在细胞内的过表达引起的生物过程涉及许多不同基因表达的变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王琳	解放军第302医院感染内科	112	736	13.0	23.0
2	成军	解放军第302医院感染内科	117	1347	20.0	31.0
3	刘妍	解放军第302医院感染内科	62	535	12.0	21.0
4	杨永平	解放军第302医院感染内科	43	203	7.0	12.0
5	李克	解放军第302医院感染内科	28	234	7.0	15.0
6	陆荫英	解放军第302医院感染内科	17	89	6.0	8.0
7	张玲霞	解放军第302医院感染内科	41	518	12.0	22.0