屋尘螨变应原Der p 1基因原核表达产物的纯化及特性鉴定

• 作者: 付颖媛 刘志刚 吉坤美 朱健琦 杨慧 高波
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 屋尘螨 变应原 Der p 1 融合蛋白 复性 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 656-659
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.06.013

摘要

目的建立屋尘螨主要变应原Der p 1蛋白原核表达产物的纯化方法,获得理想的表达产物并鉴定其免疫原性.方法大量诱导表达含pET24a-Der p 1质粒的BL 21工程菌,表达产物以重组蛋白包涵体的形式存在,包涵体经洗涤与溶解后,使用结合6组氨酸的镍柱进行亲和层析纯化蛋白质,用稀释复性方法进行重组蛋白的复性,再用屋尘螨过敏性哮喘患者阳性血清经Dot-ELISA方法分析Der p 1纯化蛋白的抗原活性.结果分步洗涤可有效去除重组蛋白包涵体沉淀中混杂的多数杂蛋白成分,亲和层析分离可获得高纯度重组变应原Der p 1蛋白.Dot-ELISA法检测结果表明经复性并纯化的Der p 1蛋白呈强阳性反应,最佳血清稀释度为1:64,而重组蛋白与正常人血清呈阴性反应.结论纯化后的融合蛋白Der p 1具有较高的纯度及较强的免疫活性,可望作为有效的屋尘螨变应原诊断试剂和疫苗的候选分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付颖媛	江西医学院免疫学教研室	2	28	2.0	2.0
2	刘志刚	深圳大学生命科学学院	324	1724	17.0	23.0
3	吉坤美	深圳大学生命科学学院	32	237	10.0	13.0
4	高波	深圳大学生命科学学院	11	99	6.0	9.0
5	朱健琦	深圳大学生命科学学院	5	63	4.0	5.0
6	杨慧	江西医学院免疫学教研室	6	55	5.0	6.0