摘要:
目的:观察海洋药物提取剂藻酸双酯钠对血红素所致神经细胞损伤的保护作用.方法:实验于1999-01/2000-01在河南医科大学药理实验室完成.体外培养大鼠胚胎皮质神经细胞,血红素组加入100mg/L血红素建立神经细胞血红素损伤模型;正常对照组不加血红素,其余处理同血红素组.藻酸双酯钠组在血红素处理前后24 h及处理过程中加入50,100,150 mg/L藻酸双酯钠.采用噻唑蓝微量自动比色测定细胞死亡数;采用酶联免疫吸附法测定损伤神经细胞的吸光度值;测定乳酸脱氢酶漏出量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性;Fura-2负载,以荧光分光光度计测定细胞内游离钙的变化;以碘化丙啶染色,流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率.结果:①噻唑蓝测定显示50,100,150 mg/L藻酸双酯钠均可显著减少细胞死亡数;血红素组神经细胞乳酸脱氢酶漏出量高于正常对照组[分别为(1 025.20±125.86),(383.41±53.34)kat/g],50,100,150 mg/L藻酸双酯钠组乳酸脱氢酶漏出量低于血红素组[分别为(843.50±25.67),(740 15±79.02),(551.44±83.02),(1 025.20±125.86)μkat/g].②血红素组丙二醛含量与正常对照组比较显著增加[分别为(14.9±1.1),(5.1±0.6)μmol/g],超氧化物歧化酶活性显著降低[分别为(9.50±0.08),(31.17±2.83)μkat/g;50,100,150 mg/L藻酸双酯钠组丙二醛含量与血红素组比较均显著降低[分别为(11.62±0.50),(10.70±0.37),(8.76±0.78),(14.9±1.1)μmol/g]、超氧化物歧化酶活性显著升高[分别为(16.00±1.67),(22.00±1.00),(24.50±0.83),(9.50±0.08)μkat/g].③神经细胞损伤后血红素组[Ca2+]i含量高于正常对照组[分别为(579±39),(145±35)nmol/L,50,100,150 mg/L藻酸双酯钠组[Ca2+]i含量低于血红素组[分别为(432±40),(376±47),(302±64),(579±39)nmol/L],抑制率分别为23%,35%,48%.④50,100,150 mg/L藻酸双酯钠组神经细胞平均凋亡率低于血红素组[分别为(25.3±5.3)%,(15.2±4.1)%,(8.9±3.1)%,(36.8±6.5)%].结论:藻酸双酯钠对血红素所致神经细胞损伤具有显著的保护作用,机制可能与藻酸双酯钠降低[Ca2+]i累积及抗过氧化作用有关.