治疗性双质粒HBV DNA疫苗的体外转染表达与鉴定

• 作者: 何晓嫱 刘惠萍 杨富强 莫国玉 陈光明 饶桂荣
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 肝炎疫苗,乙型 疫苗,DNA 转染 质粒
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 145-147
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2006.03.001

摘要

目的:探讨治疗性双质粒HBVDNA疫苗转染COS-7细胞后目的基因的表达情况.方法:以脂质体转染试剂Lipofectamine TM 2000介导,将带有preS2+S基因的重组疫苗质粒pS2.S和带有hIL2+hIFNγ融合基因的重组佐剂质粒pFP分别转染COS-7细胞,同时设立空质粒转染和未转染细胞为对照组,于转染后24,48,72,96 h采用ELISA法检测细胞培养上清的HBsAg、融合蛋白白细胞介素(IL-2)及干扰素(IFN-γ)的表达,并测定融合蛋白的IL-2、IFN-γ活性,采用ECL Western blotting分析和鉴定目的蛋白preS2+S、IL-2及IFN-γ的分子质量大小.结果:双质粒在转染COS-7细胞后不同时间均可进行分泌表达,且48 h时目的蛋白的表达量达峰值,其中表达的融合蛋白具有较高的IL-2和IFN-γ的生物学活性,pS2.S和pFP的转染上清分别在30.6 ku和110 ku处有特异性阳性反应条带.结论:HBVDNA疫苗质粒pS2.S和佐剂质粒pFP在COS-7细胞的最佳表达时间是转染后48 h,并鉴定双质粒表达产物的分子质量大小分别为30.6 ku和110 ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶桂荣	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0
2	刘惠萍	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0
3	何晓嫱	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0
4	杨富强	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0
5	莫国玉	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0
6	陈光明	广州解放军第458医院全军肝病中心	1	4	1.0	1.0