人可溶性TRAIL蛋白在衣藻叶绿体中的表达

• 作者: 刘彦信 张志芳 李董 李轶女 杨宗岐 沈桂芳 王勇 郑德先 陈凤
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL) 衣藻叶绿体 叶绿体表达 同源重组
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 1400-1405
• 页数: 6页
• 分类号: Q94
• 字数: 5690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2006.12.007

摘要

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性.以衣藻叶绿体基因组的clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2为同源重组片段,壮观霉素抗性基因为选择标记,构建了编码TRAIL胞外区可溶性片段(sTRAIL)的cDNA衣藻叶绿体表达载体p64TRAIL,通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中,经壮观霉素抗性筛选,获得了3个抗性衣藻转化子.转化子经过抗性继代筛选后,经PCR,Southern blot检测分析及暗培养,证实sTRAIL编码区DNA已整合到衣藻叶绿体基因组中,Western blot检测分析表明,sTRAIL编码区在衣藻叶绿体中获得了表达.Western blot影像摄录分析表明,表达的sTRAIL蛋白占衣藻细胞可溶性总蛋白的0.43%～0.67%.实验结果证明,用衣藻叶绿体作为生物反应器生产医药蛋白是可行的.