胆囊癌肝转移模型的建立和高转移细胞亚群的筛选

• 作者: 何小伟 刘付宝 刘颖斌 彭淑牖 朱锦辉 李克强 李兵 李江涛 王建伟 薛建锋
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆囊肿瘤 肿瘤转移 动物,实验
• 年，卷（期）: 2006,（30）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2117-2121
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3821字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2006.30.009

摘要

目的 建立胆囊癌肝转移模型并通过模型筛选高转移亚群细胞,为胆囊癌肝转移研究提供良好的实验工具.方法 胆囊癌GBC-SD细胞在含10%胎牛血清的RPMI1645体外培养、胰蛋白酶分离、生理盐水制备细胞悬液1×107/ml,4～6周龄裸小鼠脾脏接种建立胆囊癌转移模型;从实验动物肝转移灶中分离肿瘤细胞,经过原代、传代培养,同样的方法建立转移模型,进行第二轮和第三轮高转移表型胆囊癌细胞亚群的筛选.光镜下观察转移灶和筛选细胞的形态特征;抽提细胞与实验动物肝组织DNA,PCR扩增三对人类特异的微卫星序列.结果 建立了裸小鼠胆囊癌肝脏转移模型,转移灶分布肝实质各处,但以边缘为主.左叶多受侵犯,部分全肝转移.组织学观察转移病灶为腺癌.第一轮、第二轮、第三轮出转移模型在接种后10周、7周、5周形成肉眼转移灶,转移率为60%、70%、90%.从第三轮转移灶中筛选出高转移胆囊癌细胞亚群,命名为GBC-SD/M3.与亲代细胞GBC-SD相比,所筛选的GBC-SD/M3具有相似的形态特征.GBC-SD、GBC-SD/M3在微卫星D14S68、D18S69、D20S199位点扩增产物片段完全相同,荷瘤裸鼠肝脏没有扩增出相应的产物片段.结论 本实验成功建立了胆囊癌肝转移模型;从转移模型中筛选出高转移胆囊癌细胞亚群GBC-SD/M3,与亲代细胞GBC-SD相比,形态和遗传背景保留一致性,但具有更高转移能力.