Survivin反义寡核苷酸诱导人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的实验研究

• 作者: 张轶庠 杨江根 申鹏飞 章道恒 陈合群 陈湘 齐范
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱移行细胞癌T24细胞 反义寡核苷酸 Survivin 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1955-1960
• 页数: 6页
• 分类号: R737.14
• 字数: 5027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2006.13.010

摘要

目的Survivin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达.因此,观察Survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响.方法设计合成针对Survivn mRNA特异性的ASODN,透射电镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测各组细胞增殖指数(proliferative index,PI)和凋亡指数(apoptotic index,AI),RT-PCR法分析转染后Survivn mRNA及Caspase-3 mRNA的变化,Western Blot法检测各组Survivn蛋白表达情况,荧光分光光度法测定Caspase-3的活性水平;MTT实验测定T24细胞对丝裂霉素(mitomycin,MMC)的敏感性.结果ASODN转染组透射电镜下观察到凋亡的征象,而各对照组未见凋亡证据;各转染组细胞AI明显高于各对照组,PI明显低于各对照组(P＜0.01),且在一定范围内呈量-效关系,各对照组间差异无显著性(P＞0.05);各转染组细胞Survivin mRNA、Survivin的表达较各对照组明显下调(P＜0.01),各对照组间差异无显著性(P＞0.05);Caspase-3 mRNA的表达在各组细胞间差异无显著性(P＞0.05);各转染组细胞Caspase-3活化水平较各对照组明显提高(P＜0.01),各对照组间差异无显著性(P＞0.05);MTT实验显示,转染组MMC半数抑制浓度(IC50)较对照组明显下降,ASODN可提高T24细胞对MMC的敏感性.结论Survivin ASODN转染T24细胞后可特异性封闭Survivin的表达,对Caspase-3 mRNA的表达无明显作用,能激活Caspase-3无活性前体,从而诱导T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,提高T24细胞对化疗药物MMC的敏感性.