大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定

• 作者: 任发政 宋柬 郝佳 陈尚武 马会勤
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 苯丙氨酸解氨酶(PAL) pET-31b(+) 基因克隆 重组表达 肉桂酸
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-35
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 4444字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2006.07.001

摘要

利用基因重组技术,克隆了大豆(Glycine max(L.)Merr.)的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)全基因,构建pET-GM PAL工程表达质粒,在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并利用细胞裂解液得到的粗酶液转化L-苯丙氨酸生成肉桂酸.通过8%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,获得了分子量在77.9kD的一条蛋白质特异表达带,特异蛋白质表达量达到总蛋白质含量的8%左右.通过初步发酵,获到具有PAL活性的粗酶液裂解液,粗酶的比活力达到211.7μmol/g pro·min(3529μkat/kg),高于红酵母PAL和欧芹重组PAL表达的比活力.结果表明克隆重组的大豆PAL基因通过表达质粒pET-GMPAL在E.coli中能高效地表达为有催化功能的高活力酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马会勤	中国农业大学农学与生物技术学院果树学系	70	702	14.0	24.0