人巨细胞病毒PP150的原核表达及其ELISA诊断方法的建立

• 作者: 徐博 王清
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒,人类 基因,原核表达 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2006,（29）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 23-25
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2006.29.009

摘要

采用基因工程方法组建含有人巨细胞病毒(HCMV)PP150蛋白强抗原决定簇基因的重组抗原克隆,进行诱导表达及纯化,在此基础上,以纯化重组PP150蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化,确定判定标准,建立检测HCMV IgM抗体的间接ELISA方法.用此方法检测266份血清样品,并与ELISA试剂盒检测结果相比较.结果重组表达质粒pMAL-P2-PP150可在E.coliDH5a中有效表达,表达产物经SD S- PAGE电泳后,凝胶成像系统分析显示相对分子质量约为64 000,约占菌体蛋白的10%.Western blot检测,阳性识别率为80%(12/15).用此蛋白包被ELISA板,检测正常孕妇血清,与ELISA试剂盒的诊断符合率为98.1%,敏感性达88.2%,特异性100%.应用本方法检测569份正常人血清样品HCMV-IgM,阳性率为4.1%.提示该重组蛋白具有良好的抗原性,可望替代HCMV感染检测中的全病毒ELISA试剂盒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王清	青岛大学医学院附属医院	19	115	5.0	10.0
2	徐博		2	4	1.0	2.0