EBV-LMP1 C端RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选

• 作者: 何芸 杨玉成 洪苏玲 王袆琴 钱迪 黄江菊
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 体外转录 EB病毒 潜伏膜蛋白1(LMP1) 脱氧核酶
• 年，卷（期）: 2006,（24）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 2426-2429
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.24.011

摘要

目的 探讨用体外转录方法制备EBV-LMP1 C端RNA并用该RNA对其靶脱氧核酶进行初步筛选.方法 用巢式PCR方法从绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 exon c,重组入pGEM-11zf载体,并用T7RNA聚合酶对其进行体外转录制备EBV-LMP1 C端RNA.根据该RNA的一、二级结构设计合成3种靶向10～23脱氧核酶,据体外剪切效率筛选高效特异的靶向脱氧核酶.结果 成功地构建含EBV-LMP1 exon c基因的重组质粒,用体外转录方法用1 μg质粒转录出40.25 μg高纯度的EBV-LMP1 C端RNA,有1种脱氧核酶DZ1对该RNA体外剪切效率达89%.结论 用T7RNA聚合酶体外转录方法成功制备了高纯度的EBV-LMP1 C端RNA,经体外剪切筛选出高效特异的1种脱氧核酶,为进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄江菊	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	57	374	13.0	18.0
2	洪苏玲	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	136	712	14.0	21.0
3	杨玉成	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	70	295	8.0	15.0
4	钱迪	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	20	128	5.0	10.0
5	王袆琴	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	6	47	3.0	6.0
6	何芸	重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科	6	14	2.0	3.0