猪膀胱移行上皮细胞培养及其在纤维蛋白凝胶表面生长的评价

• 作者: 杨中华 杨海超 王行环 胡礼泉 蒲小勇
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程 膀胱 上皮细胞 凝胶类
• 年，卷（期）: 2006,（17）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 61-64,插4
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5841字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.17.026

摘要

目的:探讨猪正常尿路上皮细胞分离、培养、扩增技术;观察利用纤维蛋白胶作为组织工程支架的可行性.方法:实验于2005-04/07在广东省人民医院医学研究中心完成.①采用酶消化法及无血清培养系统体外原代培养膀胱移行上皮细胞.②将体外扩增的膀胱上皮细胞以相同密度分别接种于普通培养板(对照组)和纤维蛋白凝胶包被的培养板(实验组),于接种后4 d比较两组细胞克隆形成情况.③再将膀胱移行上皮细胞接种于纤维蛋白凝胶包被的培养板,在不同融合度(70%,100%)时将细胞消化传代,以相同的密度再次接种于纤维蛋白包被的培养板,比较生长于纤维蛋白凝胶表面的、不同融合度的细胞传代后的克隆形成情况.(④取对数生长期膀胱移行上皮细胞,以相同密度接种于96孔板,以含不同浓度抑肽酶(0,37.5,75,150,300 kIU/mL)的keratinocyte-SFM培养,4 d后以四甲基偶氮唑盐法观察比较移行上皮细胞生长情况(不含抑肽酶者为对照组).结果:①移行上皮细胞生长良好,多次传代后仍扩增迅速.②膀胱移行上皮细胞在培养板和纤维蛋白凝胶表面均生长良好,4 d后细胞克隆形成率在纤维蛋白凝胶表面和培普通培养板无明显差异[(8.67±1.45)%,(9.33±1.76)%,P＞0.05].③生长于纤维蛋白凝胶表面的细胞传代后仍有较强的增殖能力,且70%融合组传代细胞克隆形成率显著高于100%组[(18.2±1.08)%,(12.8±1.35)%,P＜0.05].④抑肽酶在300 kIU/mL时对细胞生长有显著抑制作用;而在其他浓度时则不明显.结论:①该法培养猪膀胱上皮细胞迅速可靠,多次传代后仍有较强的增殖能力.②细胞在纤维蛋白凝胶表面生长良好,传代后仍然有较强的增殖能力.③纤维蛋白凝胶具有作为泌尿系腔道组织工程支架的潜在运用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡礼泉	武汉大学中南医院泌尿外科	142	886	16.0	22.0
2	王行环	广东省人民医院泌尿外科	59	628	12.0	22.0
3	杨中华	武汉大学中南医院泌尿外科	68	380	11.0	14.0
4	杨海超	武汉大学中南医院泌尿外科	3	9	2.0	3.0
5	蒲小勇	武汉大学中南医院泌尿外科	2	8	2.0	2.0