摘要:
目的:观察中成药坤宁安对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法:实验于2004年在黑龙江中医药大学完成.选用13~15个月龄雌性Wistaer大鼠50只,经阴道脱落细胞涂片检查,呈现出无动情周期确定为围绝经期鼠.随机分为5组,围绝经期模型组、坤宁安高剂量组,坤宁安低剂量组、替勃龙对照组、更年康对照组,每组10只.另选5月龄雌性Wistar大鼠10只作为青年对照组.围绝经期模型组给予生理盐水2 mL,坤宁安高剂量组给予1.96 g/kg坤宁安混悬液(组成为柴胡、桂枝、龙骨、牡蛎、白芍、当归等);坤宁安低剂量组给予0.49g/kg坤宁安混悬液;替勃龙对照组给予0.136 mg/k g替勃龙混悬液;更年康对照组给予0.15 g/kg更年康混悬液;青年对照组给予生理盐水2 mL,灌胃1次/d.灌胃4周后,断头处死,剖取大鼠卵巢,即供原位杂交法检测Bcl-2 mRNA的表达.卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2 mRNA阳性评定标准:根据切片卵巢组织中卵泡内颗粒细胞免疫组织化学染色的深浅分4级,未被染色的为阴性表达,深棕色为弱阳性表达,棕黄色为中度阳性表达,棕褐色为强阳性表达.为统计方便,予以半定量计分:1,2,3,4分别对应阴性表达,弱阳性表达,中度阳性表达,强阳性表达.每张切片至少观察3个视野.结果:实验过程中,围绝经期模型组、更年康对照组各有1只大鼠死亡.其余大鼠均存活直至实验结束.青年对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2mRNA呈强阳性表达,围绝经期模型组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2 mRNA呈弱阳性表达,青年对照组与之相比差异有极显著性意义(P<0.01).坤宁安高、低剂量组、替勃龙对照组大鼠卵巢颗粒细胞均有不同程度的Bcl-2 mRNA阳性表达,与围绝经期模型组大鼠比较差异均有极显著性意义(P<0.01),更年康对照组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2 mRNA蛋白表达呈弱阳性,与围绝经期模型组比较差异有显著性意义(P<0.05).结论:围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡与Bcl-2 mRNA的阳性表达呈负相关,坤宁安通过调控大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2 mRNA的表达,达到延缓卵巢颗粒细胞凋亡的目的.