早期高血糖可致大鼠脑内神经原蛋白质的非酶糖基化反应

• 作者: 盛树力 胡景胜 马学毅
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 高血糖症 糖尿病 免疫组织化学 鼠
• 年，卷（期）: 2006,（34）
• 所属期刊栏目: 神经再生相关基础研究
• 页码范围: 95-98,封三
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 6644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.34.040

摘要

目的:观察早期高血糖对大鼠脑内神经原组织蛋白质非酶糖基化反应的影响.方法:实验于1998年在首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室完成.选取3月龄雄性Wistar大白鼠35只(Ⅱ级),随机数字表法分为2组,糖尿病模型组20只和正常对照组15只.以10g/L链尿佐菌素60mg/kg腹腔注射制备糖尿病模型,血糖≥15 mmol/L时,表明糖尿病模型制备成功,纳入糖尿病模型组.于成模后1,2,3个月分别测定各组大鼠的血糖和体质量.并与实验前比较.自行制备抗牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗体:①制备牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗原.②选取纯种无特殊病原体3月龄雄性昆明小鼠11只(Ⅲ级)接种牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物.③免疫动物.④抗晚期糖化终末产物多抗初步纯化及检测:采用ELISA方法.于糖尿病成模后1个月行晚期糖化终末产物免疫组织化学检查.结果:糖尿病模型组20只,其中17只在注射链尿佐菌素24～48 h后即出现多饮、多食、多尿等症状,测定全血血糖≥15 mmol/L,观察1个月内死亡4只.余13只和正常对照组大鼠15只进入结果分析.①糖尿病大鼠成模1,2,3个月时糖尿病模型组平均血糖均显著高于正常对照组[1个月:(28.8±2.8),(6.2±0.9)mmol/L,P＜0.001];[2个月:(23.1±5.5),(6.1±0.8)mmol/L,P＜0.001];[3个月:(25.4±5.1),(6.1±0.7)mmol/L,P＜0.001];其体质量均显著低于正常对照组[1个月:(250.1±52.2)g,(422.6±36.2)g,P＜0.001];[2个月:(263.8±50.0),(462.6±39.0)g,P＜0.001];[3个月:(261.5±42.6),(485.0±28.8)g,P＜0.001].②以不同浓度牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物免疫小鼠2次后,测血清抗牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗体效价,结果显示抗体效价在1:1 000时具有较大的吸光度值.③检测腹水中抗体的最终效价,结果显示5～50 mg/L的牛血清白蛋白的晚期糖化终末产物抗原包板液浓度均具有较高吸光度值.④以20mg/L的抗原浓度包板后行ELISA法检测制备腹水抗体效价,显示腹水抗体在1:4 000时有最大吸光度值,1:20 000时还有较大吸光度值.成功制备了牛血清白蛋白晚期糖化终末产物多克隆抗体.⑤晚期糖化终末产物免疫组化染色显示,糖尿病组于糖尿病1个月时即已有免疫组化染色阳性神经元存在,而正常对照组则不明显.免疫组化阳性物质多见于细胞浆.结论:糖尿病大鼠成模1个月后即可在海马、皮质神经元细胞内发现晚期糖化终末产物的表达.糖尿病早期高血糖即可引起脑内神经元蛋白质的糖基化反应,可能在神经元退行性改变发病机制中具有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	盛树力	首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室	114	875	13.0	24.0
2	胡景胜	解放军总医院第一附属医院内分泌科	8	37	3.0	6.0
3	马学毅	解放军总医院第一附属医院内分泌科	4	20	2.0	4.0