鸡肌腱的玻璃化冷冻保存

• 作者: 张伯勋 胡成栋 赵斌 郭义柱 陈华 魏民 黄靖香
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织保存 低温保存 肌
• 年，卷（期）: 2006,（25）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 106-108
• 页数: 3页
• 分类号: R329
• 字数: 4529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.25.043

摘要

目的:筛选出适合于肌腱玻璃化冷冻保存的溶液及保存程序,并通过细胞培养来进一步检测玻璃化肌腱的活性.方法:实验于2003-11/2005-02在解放军总医院骨科研究所完成.实验包括①筛选与检测:取来亨鸡30只,切取屈趾深肌腱,按随机数字法分为2组,新鲜鸡肌腱组,玻璃化组.运用正交设计和肌腱活性快速检测技术,筛选出适合鸡屈趾肌腱玻璃化保存程序,再从6种玻璃化溶液中(二甲基亚砜+乙酰胺+丙二醇+聚乙二醇;乙二醇+二甲基亚砜+蔗糖;乙二醇+二甲基亚砜+丁二醇;丙二醇+二甲基亚砜+蔗糖;二甲基亚砜+乙酰胺+丙二醇;二甲基亚砜+丙二醇)筛选出适于肌腱玻璃化保存的配比方案.②细胞培养:将玻璃化法保存鸡屈趾深肌腱进行细胞培养,观察培养后细胞的存活情况,以了解玻璃化法保存肌腱的细胞活性.结果:①通过统计学分析,肌腱玻璃化保存的最佳程序为平衡处理选择4℃3个浓度梯度、平衡时间选择4℃30 min、洗脱处理选择4℃3个浓度梯度、洗脱时间选择4℃20 min.玻璃化溶液二甲基亚砜+丙二醇为的最佳配比方案.②应用酶消法测得新鲜肌腱活性为89.26%,玻璃化法优化组合所保存肌腱的活性为78.49%.③将玻璃化组肌腱进行细胞培养,细胞第8天自组织块周边长出,第21天后传代,培养3代后出现明显的退化现象,玻璃化组肌腱细胞的生物学特性与新鲜肌腱组相似.④将两组肌腱所培养的细胞分别进行免疫组织化学染色,经鉴定均为肌腱细胞.结论:玻璃化法冷冻保存的肌腱具有良好的细胞活性,经细胞培养获得成功,其生物学特性无明显变异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏民	解放军总医院骨科	82	398	11.0	14.0
2	赵斌	解放军总医院骨科	79	719	15.0	23.0
3	胡成栋	无锡市手外科医院骨科	3	6	2.0	2.0
4	陈华	解放军总医院骨科	137	1302	18.0	30.0
5	张伯勋	解放军总医院骨科	114	1008	18.0	25.0
6	郭义柱	解放军总医院骨科	49	507	13.0	20.0
7	黄靖香	解放军总医院骨科	81	690	15.0	22.0