大鼠精原细胞的分离纯化及免疫化学研究

• 作者: 丁强 张元芳 汪洋 王翔 马良宏
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精原细胞 细胞分离 纯化 原癌基因蛋白质c-kit 整合素
• 年，卷（期）: 2006,（20）
• 所属期刊栏目: 生殖医学
• 页码范围: 1371-1375
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5285字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2006.20.002

摘要

目的探讨大鼠精原细胞的分离纯化方法及纯化后的细胞特性.方法应用复合酶消化法制备10 d龄SD大鼠的睾丸单细胞悬液,采用差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞.分别以c-kit和α6-整合素作为细胞标记,观察睾丸组织中的精原细胞与纯化后细胞的免疫化学特征.通过流式细胞仪分别检测纯化后细胞表达c-kit和α6-整合素的阳性率.结果在睾丸组织中精原细胞特异表达c-kit和α6-整合素.纯化后的单细胞中有c-kit和α6-整合素的阳性表达.流式细胞仪检测:以c-kit作为细胞标记,未纯化组的阳性表达率为1.59%±0.04%,纯化组为68.33%±2.45%,两组差异非常显著(P＜0.01);以α6-整合素作为细胞标记,未纯化组的阳性表达率为2.38%±0.60%,纯化组为72.04%±3.65%,两组差异非常显著(P＜0.01).台盼蓝排斥试验表明纯化后细胞的活性率＞95%.结论C-kit、α6-整合素可作为特定时期精原细胞的表面标志.采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法纯化精原细胞,能获得纯度和活性较高的精原细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪洋	复旦大学上海医学院解剖组胚系	118	753	14.0	20.0