摘要:
背景:动物实验证明乙醇可引起股骨头内脂肪积聚,导致骨坏死,其作用机制不详.NIH 3T3成纤维细胞是一种多潜能干细胞,尚未见关于乙醇对NIH 3T3成纤维细胞作用的有关报道.目的:观察乙醇对NIH 3T3成纤维细胞分化为脂肪细胞的作用,及其对成脂转录因子过氧化物酶体增殖子活化受体-γ表达的影响.设计:单一样本观察.单位:郑州大学基础医学院生物化学教研室和郑州大学第一附属医院骨科.材料:NIH-3T3成纤维细胞由美国弗吉尼亚大学医院骨科实验室提供.方法:实验于2002-04/2003-06在郑州大学基础医学院生物化学教研室实验室完成.取NIH-3T3成纤维细胞随机分为6组,每天分别加入体积分数为0.998乙醇,剂量为0(对照组),0.03,0.06,0.09,0.15,0.21 mol/L,培养至14 d,苏丹Ⅳ染色,采用电子计算机图像分析软件Image Pro Plus 4.1,确定脂肪细胞百分比.采用反转录聚合酶链反应技术,检测细胞过氧化物酶体增殖子活化受体-γmRNA的表达.主要观察指标:①NIH 3T3细胞分化为脂肪细胞结果.②乙醇组和对照组细胞基因表达结果.结果:以递增浓度(0.03,0.06,0.09,0.15,0.21 mol/L)乙醇处理细胞14 d.①各乙醇组中脂肪细胞百分比分别为11.9%,23.8%,28.2%,31.1%,42.6%,分别是对照组(9.6%)的1.2,2.5,2.9,3.2,4.4倍.0.03 mol/L乙醇组与对照组的差别无统计学意义(P>0.05),其余4组与对照组及0.03 mol/L乙醇组的差别有高度显著性(P<0.001).②各乙醇组细胞中过氧化物酶体增殖子活化受体-y mRNA表达值与18S基因表达值的比值分别为0.218,0.411,0.486,0.473,0.453,分别是对照组(0.197)的1.1,2.1,2.5,2.4,2.3倍.0.03 mol/L乙醇组与对照组的差别无统计学意义(P>0.05).其余4组与对照组及0.03 mol/L乙醇组的差别有高度显著性(P<0.001).结论:乙醇能够直接诱导NIH 3T3成纤维细胞大量分化为脂肪细胞,这可能是乙醇性骨坏死时骨髓内脂肪增多的原因之一.