摘要:
目的:以在某种程度上可反映成骨细胞增殖的成骨样细胞UMR106为靶细胞,考察蛇床子素对其细胞形态、增殖率和分化程度的影响.方法:实验于2003-03/2004-03,在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行.以大鼠成骨肉瘤细胞系UMR106为靶细胞,以雌二醇1×10-8 mol/L为阳性对照,同时设空白对照组,蛇床子素干预组分为1×10-8 mol/L,1×10-7 mol/L,1×10-6 mol/L 3个浓度组.①调整细胞浓度为4×107 L-1,接种于12孔培养板上.48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态变化.②调整细胞浓度为2×107 L-1,接种于96孔培养板,采用四唑盐法测定各孔的吸光度,计算平均增殖率.③调整细胞浓度为2×107 L-1,接种于24孔培养板,磷酸对硝基苯基质动力学法测定细胞内外碱性磷酸酶活性.上述实验每组均设8个复孔.结果:①培养基中加入蛇床子素培养48 h后,与对照组相比UMR106细胞数量明显增多,核分裂期多见,1×10-6 mol/L,1×10-7 mol/L组可见细胞重叠生长,分泌基质堆积明显.②UMR106细胞经蛇床子素处理48 h后,相对于对照组,1×10-6 mol/L组增殖率为52%,1×10-7 mol/L组为37%,1×10-8 mol/L组为16%.3个给药组与对照组相比差异均有显著性(t=37.36,14.94,6.81,<0.01).③UMR106细胞经蛇床子素1×10-6 mol/L和经雌二醇1×10-8 mol/L处理24 h和48 h后,细胞内碱性磷酸酶活性均显著高于对照组[(825.17±12.34),(775.16±8.67),(715.14±14.17)μkat/g;(2415.48±15.84),(2 355.47±5.67),(2285.49±7.67)μkat/g;t=16.56,10.22;20.89,34.90,P<0.01].④UMR106细胞在浓度为1×10-6,1×10-7 mol/L的蛇床子素及雌二醇10-8 mol/L培养24 h后,细胞外碱性磷酸酶活性显著高于对照组[(781.66±11.50),(733.15±15.34),(728.81±9.84),(652.80±11.34)μkat/g;t=22.56,11.91,14.32,P<0.01].结论:蛇床子素可剂量依赖地促进UMR106细胞的增殖,刺激UMR 106细胞的碱性磷酸酶活性,提示其可能具有直接促进成骨细胞增殖、分化的作用.