摘要:
背景:阿尔茨海默病是一种老年神经系统退行性疾病,神经元凋亡被认为是其可能的发病原因之一,体外细胞培养是研究其凋亡机制的常用方法.目的:观察一氧化氮供体硝普钠对体外培养的海马神经元cpp32基因表达的影响.设计:随机对照动物实验.单位:广东医学院生物化学与分子生物学研究所.材料:实验在广东医学院生物化学与分子生物学研究所完成,实验动物为新生(出生24 h以内)SD大鼠.方法:取大鼠海马神经元进行原代培养,采用终浓度分别为0,25,50,100,200,400 μmol/L的硝普钠处理海马神经元24 h,用反转录聚合酶链反应检测mRNA表达变化,Western blot检测蛋白表达的变化;再用终浓度分别为0,25,50,100,200 μmol/L的硝普钠处理海马神经元12 h,用CPP32活性检测试剂盒检测CPP32酶活性.主要观察指标:cpp32 mRNA表达、CPP32蛋白表达及CPP32酶活性检测.结果:随着硝普钠剂量的增加,cpp32 mRNA表达无改变;但CPP32酶原被裂解活化,从硝普钠50μmol/L开始,酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100 μmol/L达最大值,为对照组的3.47倍.结论:硝普钠不增加cpp32 mRNA的表达,但可诱导CPP32酶原的裂解,使CPP32活化.