摘要:
目的:探讨氯氮平对雄性C57BL/6小鼠胰腺β细胞凋亡的影响.方法:实验于2004-03/09在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成.选择清洁级雄性C57BL/6小鼠63只,体质量(20±2)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供[许可证号:SCXK(沪)2003-0003].随机分为空白组21只、氯氮平4mg/kg组21只、氯氮平20mg/kg组21只,各组小鼠的体质量和基础血糖值无显著差异(P>0.05).所有动物每7只分笼饲养于光照12 h(7 Am~7 Pm),相对湿度45%的普通设施中,普通全价鼠饲料喂养,自由进食及饮水.①模型制作:氯氮平充分研磨后加入蒸馏水,配成浓度为2g/L和0.4g/L的悬浊液,灌胃前充分摇匀.氯氮平4 mg/kg组灌胃0.4g/L的悬浊液0.2 mL,氯氮平20 mg/kg组灌胃2g/L的悬浊液0.2mL,空白组灌胃同样剂量的蒸馏水.按发病不同时间每组再分为3组,各7只,超急性期组灌胃1次;急性期组灌胃1次/d,共7次;慢性期组灌胃1次/d,共28次.②标本的处理:禁食12 h(8 Pm~8 Am)后,超急性期组在第1次灌胃后3 h,急性期组(1周)和慢性期组(4周)灌胃1次/d,最后一次灌胃后3 h,摘眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠,立即取小鼠的胰腺置体积分数为0.1的中性甲醛液中固定24 h,常规制作石蜡切片,厚4μm.采用苏木精-伊红染色,光镜下观察胰岛炎的情况.应用原位末端转移酶标记法染凋亡细胞,用链霉亲合素-生物素化过氧化物酶复合物免疫组织化学法染β细胞,进行β细胞凋亡计数.结果:纳入动物63只,均进入结果分析.①苏木精-伊红染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20mg/kg组小鼠胰岛均位于胰腺外分泌部之中,其岛形丰满,轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,均未见淋巴细胞浸润.②免疫组织化学染色显微镜观察显示:空白对照组、氯氮平4mg/kg组、氯氮平20 mg/kg组小鼠胰岛轮廓清晰,胰岛细胞分布均匀,内外分泌部界限清楚,大量的β细胞胞浆呈棕黄色的胰岛素阳性表达,未见β细胞凋亡,可见少量散在的胰腺腺泡细胞凋亡.结论:氯氮平对胰腺β细胞没有明显的毒害作用,不诱导β细胞的凋亡.