氯霉素单克隆抗体的研制及其免疫学特性鉴定

• 作者: 张改平 杨艳艳 柴书军 王自良 王选年 范国英 邓瑞广
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 氯霉素 人工免疫原 单克隆抗体 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医科学
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: S859.84
• 字数: 4593字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2006.05.002

摘要

将氯霉素(CAP)中的羟基(-OH)与琥珀酸酐反应引入活性基团羧基形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与BSA和OVA偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被抗原OVA-CAP-HS,采用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备氯霉素单克隆抗体(CAP mAb),并对其效价、亲和性和特异性等进行鉴定.结果表明,BSA与CAP-HS偶联成功,分子结合比为1∶15.6;筛选出1A10、2B5、4F9共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶6.4× 102、1∶3.2×102、1∶1.28×103,腹水分别为1∶1.6×105、1∶8× 104、1∶6.4× 105,同种型分别为IgG1/κ、IgG2a/λ、IgG2a/κ,亲和常数(Ka)分别为2.14×108、1.68× 109、1.84×1010(L/mol);亲和力最高的4F9株对CAP的IC50为7.54ng/ml,经WestGold鉴定与CAP特异性结合,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应分别为150%,与其它CAP类药物和抗菌素无交叉反应性.通过试验获得了抗CAP高价、敏感、特异的mAb,可用于CAP残留检测的免疫学试验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王自良	河南科技学院动物科学学院	141	803	15.0	20.0
2	张改平	河南省农科院生物技术研究所	103	840	15.0	24.0
3	杨艳艳	河南省农科院生物技术研究所	28	264	9.0	15.0
4	王选年	河南科技学院动物科学学院	43	241	9.0	14.0
5	邓瑞广	河南省农科院生物技术研究所	63	543	11.0	20.0
6	柴书军	河南省农科院生物技术研究所	16	147	8.0	11.0
7	范国英	河南省农科院生物技术研究所	1	9	1.0	1.0