摘要:
背景:现有镇痛药物均有不同类型及程度的不良作用,一定程度上制约了疼痛的治疗.中药镇痛作用的多靶点、多层次机制,对于疼痛治疗有一定优势.目的:观察附子汤与芍药甘草汤合用,对疼痛动物模型的镇痛作用及其可能的作用途径.设计:随机对照观察.单位:山西医科大学汾阳学院中心实验室.材料:实验于2004-10/2004-12在山西医科大学汾阳学院中心实验室完成.选择SD大鼠50只;昆明种小鼠60只.经过痛域预筛,选择痛域相近的动物用于实验.方法:①附子汤合芍药甘草汤制备:附子先煎1 h,芍药、白芍(酒炒)、甘草(蜜灸)750 mL/L乙醇提取,0.5 h/次,共3次回收乙醇.合并各提取液浓缩至含生药4 g/mL.②附子汤合芍药甘草汤对甲醛溶液致痛模型大鼠的镇痛作用:SD大鼠50只分为5组,即模型组、阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg,10 g/kg组,每组10只.模型组和阿司匹林组分别给予25 mL/L甲醛溶液10 mL/kg和阿司匹林0.2 g/kg,各组均灌胃给药.各组给药前在大鼠左后肢足趾部皮下注射25 mL/L甲醛溶液50μL,分别记录注射甲醛溶液1~5 min(Ⅰ相)和15~40 min(Ⅱ相)内疼痛反应的累积时间进行评分.疼痛累积分值=(抬起注射脚时间×1+咬和抖动注射脚时间×2)/300.实验动物饲养1周后,灌胃给药连续3 d,第3天给药1 h后左后肢足趾部皮下注射25 mL/L甲醛溶液50 mL,按上述方法计算疼痛累积分值.计算镇痛评分值,即给药后累积分值/给药前累积分值×100%.③冰醋酸致痛小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素和超氧化物歧化酶的测定:昆明种小鼠60只分为6组,设空白对照组、模型组、阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg,10 g/kg组,每组10只.空白对照组和模型组分别腹腔注射生理盐水10 mL/kg和6 g/L冰醋酸溶液10 mL/kg,阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg,10 g/kg组于给药第3天给药1 h后,腹腔注射6 g/L冰醋酸溶液10 mL/kg.注射冰醋酸10 min后,小鼠眼后静脉丛采血,分离血清,测定一氧化氮浓度(催化光度法)、前列腺素含量(紫外分光光度法)、超氧化物歧化酶活性.主要观察指标:①各组大鼠的镇痛评分值.②各组小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素含量和超氧化物歧化酶活性.结果:SD大鼠50只及昆明种小鼠60只,全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠的镇痛评分值比较:附子汤合芍药甘草汤40 g/kg组大鼠的Ⅰ相镇痛评分值显著低于模型组[82.1±9.8,95.3±8.7(t=3.17,P<0.05)].附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg组大鼠的Ⅱ相镇痛评分值均显著低于模型组[69.7±10.4,73.2±7.5,98.9±6.7(t=6.64,6.08,P<0.01)].②各组小鼠血清、脊髓中一氧化氮、前列腺素含量和超氧化物歧化酶活性比较:阿司匹林组、附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg,10 g/kg组与模型组相比,一氧化氮、前列腺素含量均显著减少,超氧化物歧化酶活性显著增高(t=3.21~19.30,P<0.05~0.01).附子汤合芍药甘草汤40 g/kg,20 g/kg组与阿司匹林组相比,一氧化氮、前列腺素含量均显著减少,超氧化物歧化酶活性显著增高(t=2.82~7.43,P<0.05).结论:附子汤与芍药甘草汤提取物合用,能抑制甲醛溶液引起的Ⅰ相及Ⅱ相疼痛,显著降低冰醋酸疼痛模型小鼠血清中和脊髓中的一氧化氮、前列腺索的含量,增加超氧化物歧化酶的活性.提示二方合用对中枢及外周神经末梢均有镇痛作用,其镇痛作用可能与一氧化氮、前列腺素、超氧化物歧化酶改变有关.