摘要:
目的:探讨c-fos基因表达在全脑缺血再灌注后不同时间的变化规律.方法:实验动物全部采用由白求恩医科大学实验动物中心提供的雄性昆明小鼠,6~7周龄,体质量25~28 g.①动物分组:第1批:40只小鼠随机分为假手术组5只,脑缺血再灌注组35只,根据再灌注不同时间提取标本,分别为术后1 h,1 d,3 d,7 d,2周,4周,6周,每个时间点5只.第2批:40只小鼠用于反转录-聚合酶链反应,分组同上.②模型制备及检测方法:制备全脑缺血再灌注损伤模型,假手术组不阻断颈总动脉亦不放血.采用卒中指数对各组小鼠神经病学症状进行评价.于小鼠双侧颈总动脉阻断再灌注后1 h,1 d,3 d,7 d,2周,4周,6周取小鼠额叶皮质、海马区脑组织采用免疫组织化学染色、反转录-聚合酶链反应技术,对c-fos基因表达变化进行检测.结果:80只小鼠均进入结果分析,无脱落.①免疫组化检测c-fos基因表达产物Fos蛋白结果:假手术组Fos蛋白有较弱表达,免疫组化染色假手术组未见Fos蛋白阳性神经元;再灌注1 h在额叶皮质与海马区即可见Fos蛋白表达升高,与假手术组差异显著,再灌注1 d Fos蛋白表达达最高峰,并持续至2周(P<0.01),以后随时间延长逐渐下降,到6周达假手术组水平.②反转录聚合酶链反应检测c-fos表达结果:假手术组海马区有少量c-fos mRNA表达.再灌注1 h c-fos mRNA转录水平显著升高,与假手术组差异有显著性意义(P<0.01),至5周时仍呈现较高转录水平(P<0.05),随后下降,至4周时达假手术组水平.结论:全脑缺血再灌注可诱导中枢神经系统c-fos基因的持续表达.