脂多糖对星形胶质细胞增殖和细胞内钙离子水平及活性氧与一氧化氮释放的影响

• 作者: 刘春风 周媛 李洁
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂多糖类 活性氧组分 一氧化氮 细胞
• 年，卷（期）: 2006,（33）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 171-173,封三
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 1640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.33.029

摘要

背景:星形胶质细胞是中枢神经系统中分布最广泛的细胞之一,但其在中枢神经退行性疾病中的作用目前尚未明确.目的:观察脂多糖对星形胶质细胞内钙离子、活性氧、一氧化氮水平和细胞存活率的影响.设计:观察对比实验.单位:苏州大学附属第二医院脑循环研究室.材料:实验于2005-05/2005-08在苏州大学附属第二医院脑循环研究室完成,选择8只新生1～3 d内SD乳鼠,雌雄不限,由苏州大学动物中心提供,[许可证号:SYXK(苏)2002-0037];脂多糖(Sigma公司),MTT和一氧化氮测定试剂盒(碧云天生物技术有限公司).方法:参照Kevin St.McNaught等人的方法体外分离培养新生大鼠皮质星形胶质细胞,经反复传代培养和纯化后,根据加入脂多糖剂量的不同将星形胶质细胞分为5组:空白对照组、脂多糖5 mg/L组、脂多糖10mg/L组、脂多糖20mg/L组和脂多糖40mg/L组,脂多糖对星形胶质细胞的作用时间为30 min和60 min.MTT法测脂多糖作用细胞30 min和60 min细胞存活率;Griess法测量脂多糖作用细胞30 min上清液一氧化氮的含量;采用激光共聚焦显微镜观察不同剂量脂多糖作用细胞30 min对离体大鼠星形胶质细胞内钙离子、作用细胞60 min时活性氧水平的影响,采用相对荧光强度百分比表示星形胶质细胞内钙离子浓度的变化及细胞释放活性氧的水平.主要观察指标:各组星形胶质细胞存活率;星形胶质细胞上清液中一氧化氮的含量;激光共聚焦显微镜下星形胶质细胞内游离钙和活性氧水平的变化. 结果:①脂多糖作用星形胶质细胞60 min时,脂多糖5mg/L,10mg/L,20 mg/L组的细胞存活率均升高,与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05),脂多糖10 mg/L组的细胞存活率高于脂多糖5 mg/L组和脂多糖20 mg/L组.②脂多糖40mg/L作用细胞30min后引起一氧化氮水平的升高,与对照组和其余3个剂量组相比差异有显著性(P＜0.05).③脂多糖5mg/L,10 mg/L,20 mg/L组细胞内游离钙的相对荧光强度是其相应的基础状态的200～400倍,脂多糖40 mg/L组的荧光强度是其相应的基础状态的1 000倍作用;④脂多糖5 mg/L,10 mg/L组,20 mg/L组的活性氧水平是其基础状态的200～300倍,而脂多糖40 mg/L组的绝对荧光强度峰超过了检测的范围,推测脂多糖40mg/L组的活性氧水平至少是相应基础状态的300～400倍.结论:脂多糖作用于星形胶质细胞后可使其胞钙离子浓度升高,活性氧和一氧化氮释放增加,促进细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘春风	苏州大学附属第二医院神经内科	349	3050	25.0	34.0
2	周媛	苏州大学附属第二医院神经内科	15	99	5.0	9.0
3	李洁	苏州大学附属第二医院神经内科	43	387	11.0	19.0