摘要:
背景:在应用组织工程修复周围神经的研究中,载体的选择至关重要.理想的载体应与细胞外基质类似,与活体细胞有良好的生物相容性.目的:评价豚鼠海马神经干细胞与胶原蛋白海绵和明胶海绵的生物相容性,探讨它们作为周围神经组织工程载体材料的可行性.设计:随机对照实验.单位:郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科,郑州大学基础医学院解剖教研室.材料:实验于2005-07/2005-12在郑州大学基础医学院解剖教研室神经生物学研究室完成.健康新生(<24 h)杂色豚鼠12只,清洁级,雌雄不限,体质量50-70 g,由郑州大学医学院实验动物中心提供.方法:新生(<24 h)豚鼠,10 g/L水合氯醛腹腔麻醉,体积分数为0.75乙醇消毒,无菌操作分离出海马组织.体外无血清培养海马神经干细胞,传至第2代,将浓度调整为1×1010 L-1后分别与胶原蛋白海绵、明胶海绵联合体外培养,一周后取材,进行细胞计数,倒置相差显微镜及扫描电镜观察,并测定两种材料与细胞的吸附率. 主要观察指标:①观察神经干细胞在胶原蛋白海绵和明胶海绵上的生长、黏附情况,并测定其细胞总数与载体材料的吸附率.②免疫细胞化学染色分化细胞形态观察.结果:①神经干细胞可以在胶原蛋白海绵和明胶海绵上生长,逐渐黏附,胶原蛋白海绵细胞吸附率高于明胶海绵(37.17%和14.87%,x2=4.819,P<0.05).②对照组、胶原蛋白海绵组、明胶海绵组细胞总数差异无显著性[(53.17±3.5)×104,(53.25±2.6)×104,(52.04±4.05)×104,F=0.233,P>0.05].结论:胶原蛋白及明胶两种材料,尤其是胶原蛋白,具有良好的神经干细胞相容性,可以作为周围神经组织工程的支架材料应用于临床.