摘要:
背景:在影响黑素细胞功能的诸多信号介导途径中,一氧化氮被认为是一种极为重要的信号分子.大黄有效成分大黄素次酸可以影响黑素细胞的增殖及调节细胞中酪氨酸酶的活性.目的:观察大黄有效成分大黄素次酸对豚鼠皮肤黑素细胞的一氧化氮合酶表达的影响,以期确定大黄在活体皮肤中对黑素细胞的黑素合成的有效作用浓度和作用机制.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:泸州医学院附属医院皮肤科.材料:实验于2004-01/06在泸州医学院附属医院传染科实验室和泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成.选用成年健康雄性封闭群豚鼠24只.随机将豚鼠分为6组:对照组,大黄素次酸2,5,10,20,40mg/L组,每组4只.方法:①将大黄素次酸用二甲基亚砜溶解稀释为2,5,10,20,40 mg/L,分别对大黄素次酸(中国生物医学制品检定所提供,该药品为实验室提取的白色粉末纯品)2,5,10,20,40 mg/L组豚鼠臀部、背部两处局部皮肤进行相应质量浓度皮下注射处理,注射量均为1 mL.24 h后对其中一处皮肤加注1 mL相同浓度大黄素次酸一次.48 h后取材,常规石蜡切片(取对照组及大黄素次酸组未注射药物处皮肤作实验对照组).②免疫组织化学方法法显示一氧化氮合酶的表达,用光学显微镜在高倍镜下观察,识别黑素细胞,观察细胞胞质的染色及特点.用MLAS-1000图像分析仪,每组随机选择5张切片,每张切片检测20个细胞,由计算机处理系统计算出各组黑素细胞胞质中阳性免疫产物的平均吸光度(A值).③计量资料差异比较采用方差分析,并且用SNK-q进行组间比较.主要观察指标:免疫组织化学方法显示黑素细胞内一氧化氮合酶的表达,用光学显微镜和图像分析仪获得实验结果.结果:黑素细胞胞质中阳性免疫产物的平均A值:大黄素次酸2,5,10,20,40 mg/L组明显低于实验对照组(0.126±0.118,0.103±0.082,0.118±0.097,0.122±0.095,0.112±0.078,0.196±0.066,P<0.05);大黄素次酸各质量浓度组间差异不明显(P>0.05).结论:①大黄素次酸对黑色素细胞一氧化氮合酶的表达具有调节作用,提示大黄对黑素细胞的调节通过一氧化氮信号传导通路.②大黄素次酸在2~40 mg/L的质量浓度内,一氧化氮合酶的表达不随大黄素次酸的质量浓度改变而发生变化.