神经生长因子及其受体在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达及其生物学意义

• 作者: 张志坚 彭浩 杨勇 王存祖 虞浩 陈永昌 陈超波 龚爱华
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 神经生长因子 受体蛋白质酪氨酸激酶类
• 年，卷（期）: 2006,（38）
• 所属期刊栏目: 神经再生相关基础研究
• 页码范围: 94-96,封三
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4972字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.38.034

摘要

目的:观察神经生长因子在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达、分布及其生物学作用.方法:实验于2005-07/12在江苏大学医学院基础与临床研究中心完成.①U251培养3 d后,于培养基中加入终浓度为2 mmol/L羟基脲继续培养24 h(≥1个细胞周期),使细胞同步化于DNA合成期.②用免疫荧光法对细胞内神经生长因子及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶受体A进行染色定位.③免疫印迹法检测U251培养上清液中的神经营养因子表达.④促胚胎脊髓神经细胞生长试验鉴定U251细胞培养上清液的神经营养因子活性.取怀孕16 d的SD大鼠1只,断头处死,浸泡体积分数为0.75的乙醇20min后剖腹取胎鼠,分离脊髓组织,细胞培养2 d后,分别加入无血清DMEM(对照组)及培养过U251 24h的无血清DMEM(实验组).结果:①神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A在U251中高表达,神经生长因子主要呈颗粒状分布于胞浆及胞核内,酪氨酸蛋白激酶受体A分布于胞膜及核仁部位.②U251无血清培养上清液能够促进胚胎脊髓神经细胞集落的形成,实验组集落数明显多于对照组(345.38±14.15),(145.5±12.71)/孔,P＜0.01);且在浓缩的U251无血清培养上清液中检测出相对分子质量为36 000的神经生长因子肽链.结论:人脑胶质瘤细胞株U251呈神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A强阳性表达,且能合成并分泌具有生物学活性的神经营养因子,相对分子质量为36 000的神经生长因子是其中主要成分之一.