摘要:
目的:观察病程早期原发性高血压患者外周血单核细胞黏附活性及分泌活性,分析此时期单核细胞是否处于预激活状态.方法:①选择2003-01/2004-10华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科门诊就诊原发性高血压患者30例.男16例,女14例;病程6~56个月.均为高血压Ⅰ~Ⅱ级,且对检测项目知情同意.选择同期本院血压正常的健康体检者30人为对照组,男女各15人;平均年龄(45±8)岁.均对检测项目知情同意.②分离出纳入对象静脉外周血单核细胞,培养后,调整细胞数至4×107 L-1,接种到24孔培养板上.每份标本设3孔,分别为基础分泌孔、血管紧张素Ⅱ刺激孔(加入血管紧张素Ⅱ1×10-8mol/L)、氯沙坦预处理孔(在1×10-8mol/L血管紧张素Ⅱ刺激前先将外周血单核细胞与氯沙坦共同孵育30 min).③培养人脐静脉内皮细胞,待细胞生长至对数增长期后,每孔加入100μL外周血单核细胞悬液,37℃下分别孵育2,4 h,经显微镜-计算机图像分析系统计数黏附细胞.高倍镜下每孔计数40个视野,取其平均值.④采用双抗体夹心酶链免疫吸附法,严格按照试剂盒说明测定外周血单核细胞培养上清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6水平.⑤采用反转录聚合酶链反应检测外周血单核细胞细胞因子基因表达.⑥组间计量资料差异性比较采用t检验.结果:原发性高血压患者30例和健康体检者30人均进入结果分析.①孵育2和4 h,外周血单核细胞与内皮细胞黏附数:高血压组在基础状态下均与对照组相当(P>0.05);血管紧张素Ⅱ刺激后两组均升高,且高血压组明显多于对照组(t=2.445,5.656,P<0.05,0.01);氯沙坦预处理后两组又降至同一水平(P>0.05).②外周血单核细胞培养上清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6水平:基础状态时,两组均较低,且差异不明显;经血管紧张素Ⅱ刺激后,高血压组明显高于对照组(t=2.537~6.984,<0.05~0.01);氯沙坦预处理后两组均有不同程度降低,组间差异不明显.③外周血单核肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6mRNA表达:在基础条件下两组处于同一水平;血管紧张素Ⅱ刺激后高血压组明显高于对照组(t=2.381~3.974,P<0.05~0.01);氯沙坦预处理后两组均减低,但差异不明显.结论:病程早期原发性高血压患者外周血单核细胞处于预激活状态.