Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因核酶抑制增生性瘢痕的实验

• 作者: 唐冰 张伟 张涛 朱家源 朱斌 李新强 李爽 陈东
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 瘢痕 成纤维细胞 胶原 核酶 动物模型
• 年，卷（期）: 2006,（28）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 85-87,封三
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 5307字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.28.037

摘要

目的:在细胞及动物体内证实前期已合成,并证实其活性的、针对Ⅰ型和Ⅲ型前胶原基因的核酶的有效性.方法:实验于2004-01/08在中山大学附属第一医院烧伤科、中山大学附属第一医院外科实验室、广州市红十字会医院创伤研究所、中山大学医学院动物实验中心完成.选取80只SPF级4～6周龄裸鼠,体质量15～25 g.随机分为注射Ⅰ型前胶原核酶A组、注射Ⅰ型前胶原核酶B组、注射Ⅲ型前胶原核酶C组、注射Ⅲ型前胶原核酶D组、注射Ⅲ型前胶原核酶E组、注射Ⅲ型前胶原核酶F组、对照组G组和空白对照组H组,每组10只.注射Ⅰ型及Ⅲ型前胶原核酶A-F组,7 d.对照组G组注射生理盐水7 d.应用苦味酸-天狼猩红染色偏振光法,观察分析各组胶原相对含量及分布的改变.同期选取增生性瘢痕来自烧伤愈后、瘢痕增生半年之患者手术切除标本.分为甲、乙、丙、丁、戊、己六种浓度组及空白对照组庚组.脂质体包裹核酶转染实验组培养细胞,测定培养上清羟脯氨酸含量、反转录多聚链反应法测量细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA含量.结果:①细胞上清羟脯氨酸含量:甲-已组明显低于庚组(2.33±0.04,2.32±0.04,2.42±0.04,2.41±0.05,2.20±0.03,2.12±0.04,2.85±0.07)μg/L,P＜0.01.②Ⅰ型胶原mRNA表达甲-已组明显低于庚组:(0.796±0.034,0.834±0.017,0.860±0.026,0.838±0.023,0.842±0.031,0.858±0.037,0.940±0.037)μg/L,P＜0.05.③Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达:甲-已组明显低于庚组:(1.496±0.039,1.668±0.052,1.154±0.093,1.078±0.093,1.270±0.060,1.182±0.111,2.001±0.099)μg/L.④应用核酶前后瘢痕体积变化:A组、G组、H组实验前明显高于实验后[(28.31±2.10,25.60±1.20)(33.65±1.76,32.71±3.92)(29.53±2.50,28.80±2.71)mm3].结论:所合成及扩增、转染的核酶可抑制人瘢痕成纤维细胞合成胶原,并能有效减少人增生性瘢痕裸鼠动物模型中瘢痕的胶原含量.