摘要:
背景:目前认为转化生长因子β与瘢痕形成关系最密切,是关键的活性分子,可影响瘢痕形成的各个阶段.抑制转化生长因子β的生物学作用,在理论上可减少瘢痕的形成.目的:探讨反义转化生长因子β1脱氧寡核苷酸对增生性瘢痕动物模型伤口愈合中瘢痕生成的抑制作用,观察使用反义转化生长因子β1的有效给药途径.设计:自身对照,动物实验.单位:解放军兰州军区总医院安宁分院整形科.材料:实验于2002-09/2003-07在兰州医学院解剖实验室完成.选择日本大耳白兔20只.方法:在每只兔耳腹侧面沿长轴避开可见血管,作两个1.0 cm×2.5 cm的长方形全层皮肤缺损创面,创面间隔1.5 cm,深达软骨表面,共80个,建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型.待兔耳创面上皮化后(平均20 d),在每只白兔左耳每个创面的上皮下用微量注射器局部封闭注射反义转化生长因子β1脱氧寡核苷酸5μL(1g/L),为转化生长因子β1组;右耳每个创面下注射生理盐水5 μL,为生理盐水对照组.注药后3,7,11,20,30 d 5个时相点切取瘢痕组织,每个时相点4只.采用苏木精-伊红染色、Masson染色及转化生长因子β1 mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的原位杂交组织化学染色.主要观察指标:苏木精-伊红染色、Masson染色和原位杂交组织化学染色结果.结果:纳入动物20只,均进入结果分析.①苏木精-伊红染色显示各组中的右耳增生性瘢痕内均可见有炎性细胞浸润并有明显的白细胞浸润带,而左耳的增生性瘢痕经反义转化生长因子β1干预后虽也有炎性细胞浸润,但未见白细胞浸润带.②Masson染色见右侧耳的增生性瘢痕从伤后3周起均可见蓝染较深的胶原纤维,至第7周时仍可见蓝染的胶原纤维,外形粗大(宽度约为8~10μm),排列杂乱无章.而左耳经反义转化生长因子β1干预的兔耳增生性瘢痕在伤后3周时,虽然亦可见蓝染的胶原纤维,但到第6,7周时胶原纤维蓝染变浅并且纤细(宽度为3~5 μm),排列整齐有序.③原位杂交显示转化生长因子β1 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA阳性细胞表达率明显降低.结论:反义转化生长因子β1能抑制兔耳增生性瘢痕的增殖过程,使瘢痕组织纤维化程度明显减轻.局部注射裸DNA治疗瘢痕的给药途径是可行的.