构建重组大鼠pEGFP-N1-IGF-1基因表达质粒

• 作者: 吕碧涛 张竟 徐盛明 李红宇 王莹 袁文 高松
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胰岛素样生长因子Ⅰ 绿色荧光蛋白质类 遗传载体 克隆,分子 寡核苷酸序列分析
• 年，卷（期）: 2006,（48）
• 所属期刊栏目: 组织损伤修复相关基础实验
• 页码范围: 122-125
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 字数: 5845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.48.045

摘要

目的:构建胰岛素样生长因子1基因的真核表达质粒(pEGFP-N1-IGF-1),为基因治疗脊髓损伤提供前提.方法:实验于2005-04/06在上海基康生物公司实验室完成.应用反转录-聚合酶链反应方法从大鼠肝脏组织总RNA中提取并扩增胰岛素样生长因子1基因的全长cDNA,并将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1.结果:实验从大鼠肝脏组织中提取总RNA,以反转录-聚合酶链反应方法获取编码胰岛素样生长因子1基因的全序列cDNA.构建胰岛素样生长因子1 cDNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实.结论:构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-1成功,实验中将能发出绿色荧光的增强型绿色荧光蛋白报告基因融合在胰岛素样生长因子1基因的3'端,并以编码柔软肽段的核苷酸连接,即保留了胰岛素样生长因子1的神经营养活性,又便于基因治疗中可检测到蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高松	解放军第二○一医院放射科	19	28	4.0	4.0
2	袁文	解放军第二军医大学长征医院骨科	18	98	6.0	9.0
3	李红宇	解放军第二军医大学长征医院骨科	2	6	2.0	2.0
4	王莹	锦州市中心医院眼科	7	16	3.0	3.0
5	吕碧涛	解放军第二军医大学长征医院骨科	3	8	2.0	2.0
6	徐盛明	解放军第二军医大学长征医院骨科	4	19	2.0	4.0
7	张竟	解放军第二军医大学长征医院骨科	2	6	2.0	2.0