大鼠胚胎脑源性神经干细胞的分离培养和鉴定

• 作者: 俞丽华 唐巍 王键 程红 胡建鹏 陈业农 韩小祥
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 增殖 分化 细胞培养
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 36-38,插图11-1
• 页数: 4页
• 分类号: R743
• 字数: 4956字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.11.015

摘要

目的:分离培养大鼠胚胎脑源性神经干细胞,并进行增殖分化鉴定.方法:实验于2005-06/12在中国科学技术大学生命科学学院周江宁研究室进行.①自孕14 d Wistar大鼠胚胎分离大脑皮质及皮质下组织,经机械吹打分离成单细胞后,利用无血清原代及传代培养方法,在添加重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人表皮生长因子和B27添加剂的DMEM/F12(1:1)培养基中进行悬浮培养,获得具有克隆能力的细胞群;用有限稀释法,得到来源于同一细胞的亚细胞系克隆.②从培养基中撤除生长因子和B27添加剂,换成含体积分数为0.1的胎牛血清的DMEM/F12培养基,将培养的细胞球接种于预先铺有多聚赖氨酸盖玻片的培养皿,诱导分化.③以免疫荧光细胞化学技术,用神经干细胞的特异性单克隆抗体(巢蛋白)和增殖细胞单克隆抗体(5-溴脱氧尿苷嘧啶)鉴定克隆细胞,以鉴定神经干细胞的自我更新增殖能力.④以免疫荧光细胞化学技术,用神经细胞的特异性抗体(神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂)鉴定分化细胞,以鉴定神经干细胞的多向分化潜能.结果:①从胎鼠大脑皮质及皮质下分离的组织,经原代和传代培养均可形成细胞克隆,并具有增殖的能力,表达神经上皮干细胞蛋白抗原和增殖细胞抗原.②在血清诱导下,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞3种神经细胞的特异性抗原.结论:运用上述方法分离培养的细胞具有自我更新和增殖能力,并具有多向分化潜能和具有神经干细胞的特异性抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王键	安徽中医学院中医临床学院中医基础理论教研室	284	2051	23.0	33.0
2	胡建鹏	安徽中医学院中西医结合临床学院病理教研室	128	1106	18.0	27.0
3	韩小祥	安徽中医学院中医临床学院	8	93	7.0	8.0
4	程红	安徽中医学院中医临床学院	34	217	9.0	14.0
5	唐巍	安徽中医学院针灸骨伤临床学院康复教研室	95	571	14.0	19.0
6	陈业农	安徽中医学院中医临床学院	34	479	14.0	21.0