成纤维细胞生长因子18对体外培养兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响

• 作者: 李林 李秀岩 杨帆 田竞 祖启明 范清宇 项良碧
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞 骨髓细胞 干细胞 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2006,（21）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 4552字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.21.003

摘要

目的:构建可稳定表达成纤维细胞生长因子18蛋白的真核表达载体,观察成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的影响.方法:本实验于2002-10/2004-03在解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所及口腔医学院完成.①将pGEM-T-FGF18-3和pSecTag2B表达载体分别用Kpn Ⅰ和NotⅠ酶切后重组pSecTag2B-FGF18质粒;ELISA检测转染后COS-7细胞上清的成纤维细胞生长因子18蛋白,以大于阴性对照A值2.1倍以上为阳性结果.②用细胞上清刺激骨髓基质干细胞,根据含小牛血清的DMEM不同比例稀释转染后COS-7细胞上清分为1:2稀释组、1:4稀释组、1:8稀释组、1:16组、1:32稀释组;对照组:用含体积分数为0.02小牛血清的DMEM培养液按1:2稀释未转染的COS-7细胞上清.③通过酶动力法检测细胞碱性磷酸酶合成情况.结果:①成功构建了pSecTag2B-FGF18真核表达载体.②转染哺乳动物细胞COS-7用夹心ELISA法检测到了成纤维细胞生长因子18蛋白质的稳定表达,原液及1:10稀释度细胞上清A值大于阴性对照A值2.1倍以上(P＜0.01).③用细胞上清刺激骨髓基质干细胞72 h后,1:2稀释组、1:4稀释组、1:8稀释组、1:16组、1:32稀释组骨髓基质干细胞A值较对照组明显增高(P＜0.01),证实了成纤维细胞生长因子18对体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的促进作用.结论:成纤维细胞生长因子18有显著促进体外培养的兔骨髓基质干细胞碱性磷酸酶合成的作用,提示成纤维细胞生长因子18对于骨髓基质干细胞的分化及成骨表型的维持起着重要的调节作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范清宇	解放军第四军医大学唐都医院骨科	54	397	12.0	15.0
2	李林	解放军第四军医大学口腔医学院	33	244	7.0	15.0
3	祖启明	解放军沈阳军区总医院骨科	26	140	6.0	11.0
4	杨帆	解放军第四军医大学口腔医学院	56	329	11.0	15.0
5	项良碧	解放军沈阳军区总医院骨科	30	121	6.0	8.0
6	田竞	解放军沈阳军区总医院骨科	8	23	3.0	4.0