摘要:
背景:亚低温(28~35℃)正成为一种治疗急性缺血性卒中较有前景的方法,低温可有效地减轻脑水肿是其神经保护作用之一.目的:观察亚低温对大鼠脑缺血再灌注后脑含水量和水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,探讨亚低温脑保护的作用机制.设计:随机对照实验.单位:徐州医学院神经生物实验室.材料:选择健康雄性SD大鼠110只,体质量250~300 g,由徐州医学院实验动物中心提供[No.SYNK(苏)2002-0079].应用SPSS 11.0统计软件将大鼠随机分3组:①假手术组(n=10);②常温组(n=50);③亚低温组(33℃,n=50).常温组及亚低温组又分为缺血后再灌注6 h,1 d,2 d,3 d,7 d各亚组,每亚组各10只大鼠.每组中5只用于脑含水量测定,5只用于苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色.方法:参考Pulsinelli方法对常温组及亚低温组大鼠制备四动脉结扎全脑缺血模型,缺血时间为15 min.假手术组大鼠仅电凝双侧椎动脉及分离颈总动脉,不作结扎,手术后24 h断头取脑.对常温组及亚低温组大鼠脑组织切片,HE染色及免疫组化染色,分别于再灌注后6 h,1 d,2 d,3 d,7 d观察脑组织病理学和AQP4表达水平的动态变化;干湿重法测定各组大鼠各时间点脑含水量.主要观察指标:①常温组及亚低温组大鼠脑组织病理学变化.②所有大鼠各时间点脑含水量及AQP4表达水平.结果:①常温组大鼠在缺血再灌注后6 h可见血管周围间隙增宽、细胞外间隙扩大、脑组织变疏松等脑组织水肿表现,以缺血再灌注后2 d最明显;亚低温组大鼠各时间点与相应的常温组比较,脑组织水肿表现相对减轻.②常温组及亚低温组大鼠缺血再灌注后6 h内即出现脑含水量增高,2 d达高峰,7 d时脑含水量明显减少,但仍高于假手术组.亚低温组脑含水量均较相应时间点的常温组少(6 h,7 d组P<0.01,余各组P<0.05).③常温组及亚低温组大鼠AQP4表达水平在再灌注后6 h增高,2 d达最高水平,7 d时明显降低,但仍较假手术组高.亚低温组AQP4表达水平均较相应时间点的常温组降低(P<0.01).结论:脑缺血再灌注后AQP4表达水平的变化趋势与脑含水量变化趋势在时间上一致,表明AQP4表达上调可能是缺血性脑水肿形成的分子机制之一.亚低温可减轻缺血性脑水肿,而通过抑制AQP4表达可能是亚低温减轻缺血性脑水肿的作用机制之一.