摘要:
背景:碱性成纤维细胞生长因子是一种具有广泛神经活性的多肽生长因子,能保护神经元,促进神经生长.有证据证实碱性成纤维细胞生长因子可治疗视网膜缺血再灌注损伤.目的:建立视网膜缺血再灌注损伤动物模型,分析碱性成纤维细胞生长因子对其视网膜细胞凋亡及调控基因蛋白表达的影响.设计:随机分组,验证性实验.单位:青岛大学医学院附属医院眼科.材料:实验于2002-04/2003-12在青岛大学医学院眼科病理研究室完成.选择健康Wistar大鼠28只,随机取4只作为正常对照组,其余24只大鼠的左眼作为生理盐水对照组,右眼作为碱性成纤维细胞生长因子组.方法:生理盐水对照组、碱性成纤维细胞生长因子组采用前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型.生理盐水对照组从玻璃体腔注入生理盐水12μL,碱性成纤维细胞生长因子组从玻璃体腔注入碱性成纤维细胞生长因子12 μL,4只/次.正常对照组不给药.分别于缺血1 h再灌注1,6,12,24,48,72 h 6个时间点采用原位缺口末端标记、免疫组织化学染色检测凋亡细胞的表达,计算凋亡指数.主要观察指标:①各组大鼠再灌注后不同时间点视网膜组织原位凋亡细胞检测结果.②各组大鼠再灌注后不同时间点视网膜组织中Fas、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2的表达.结果:①缺血再灌注大鼠不同灌注时间下视网膜组织凋亡指数的比较:正常对照组大鼠视网膜中未见凋亡细胞.与生理盐水对照组比较,碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1 h再灌注1,6,12,24,48,72 h 6个时间点凋亡指数均明显降低,且再灌注12,24,48 h时差异显著(t=5.362~5.595,P<0.05).②缺血再灌注大鼠不同灌注时间下Fas表达的变化:正常对照组大鼠视网膜中几乎无Fas表达.与生理盐水对照组比较,碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1 h再灌注1,6,12,24,48,72 h 6个时间点Fas表达均明显降低,且再灌注6,12,24 h时差异显著(t=3.954~9.327,P<0.05).③缺血再灌注大鼠不同灌注时间下半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2表达的变化:正常对照组大鼠视网膜中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2蛋白不表达.与生理盐水对照组比较,碱性成纤维细胞生长因子组于缺血1 h再灌注6,12,24,48,72 h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2表达均明显降低(t=4.125~15.641,P<0.05).结论:碱性成纤维细胞生长因子可显著抑制凋亡基因Fas及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-2在视网膜缺血再灌注损伤中的表达,从而减少神经节细胞凋亡,对视网膜缺血再灌注损伤起到治疗作用.