摘要:
目的:探讨红藻氨酸处理的C57BL/6J小鼠癫痫发作后癫痫发作敏感性能否形成及其机制.方法:实验于2004-03/06在大连医科大学生理学教研室进行.选用C57BL6J小鼠36只,实验分为盐水对照组(n=8)和红藻氨酸处理组(n=24),红藻氨酸处理组根据不同时间点又分为红藻氨酸处理后0.5 h,2 h,24 h组,每组8只.盐水对照组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0.2 mL盐水,红藻氨酸处理组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0.2 mL惊厥剂量红藻氨酸(25 m/kg)诱导癫痫发作,分别在红藻氨酸处理后0.5,2,24 h,用免疫组化技术检测海马内c-Jun免疫阳性神经元,作为神经元兴奋的形态功能指标来观察癫痫发作相关脑区的兴奋传递通路,同时检测海马门区γ-氨基丁酸免疫反应活性阳性神经元数目.红藻氨酸处理后7 d,存活的C57BL/6J小鼠被给予皮下注射12.5 mg/kg阈下剂量的红藻氨酸,以检测癫痫发作敏感性.结果:实验纳入36只C57BL/6J小鼠,中途有4只脱落,最终有32只进入结果分析.①惊厥剂量红藻氨酸诱发C57BL/6J小鼠(n=24)在30 min内出现癫痫持续状态,并伴有全身强直阵挛性惊厥,其中4只在30 min内死亡.②7 d后阈下剂量未引起癫痫发作,即癫痫发作敏感性未形成.③脑内免疫组化显示,海马各部位γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元在检测各时间点内均未见任何脱失现象;与盐水对照组比较,红藻氨酸组诱发急性癫痫发作,红藻氨酸处理后,在海马齿状回颗粒细胞c-Jun免疫反应最早增强(P<0.05),CA3部位不增强,以CA1部位c-Jun免疫反应在24 h显著性升高(P<0.001).④与盐水对照组相比,惊厥剂量的红藻氨酸处理后0.5 h,2 h,24 h,海马门区γ-氨基丁酸免疫阳性神经元的数目及染色程度未见明显改变(P>0.05).结论:C57BL/6J小鼠具有对红藻氨酸引起癫痫急性发作的敏感,可能与CA1接受内嗅皮层海马穿通通路的直接投射有关,同时C57BL/6J小鼠海马对红藻氨酸引起的γ-氨基丁酸能神经元损伤不敏感,海马门区γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元的结构功能完整性可能在防止癫痫敏感性形成方面起着关键的作用.