摘要:
目的:观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化.方法:实验于2004-07/2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成.3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组,每组12只.卵巢切除前,各组大鼠行避暗回避实验行为学检测.各组大鼠的处理:①去势组:切除双侧卵巢.②Genistein替代组:切除双侧卵巢后进行Genistein替代,剂量100 μg(溶于200μL DMSO).③雌激素替代组:切除双侧卵巢后进行雌激素替代,皮下注射苯甲酸雌二醇,剂量10 μg(溶于100 μL无菌芝麻油).④假手术组:只切开双侧腰肌不触及卵巢,随即缝合伤口,相同条件下存活4周.药物注射隔日1次,时间固定,持续4周,分别于最后1次注射24 h后进行灌注固定.各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验.脑切片用NADPH-d组织化学方法染色,观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布,并进行计数和统计分析.结果:实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析.①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);去势后行替代治疗1,2周后,各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);替代治疗4周后,Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少,滞留时间比去势组明显延长(P<0.05).②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色,胞体边界清晰,突起明显,为双极或多极细胞.内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧,呈倒"V"字形排列,体积较小,胞体多呈梭形,各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显.在斜角带核垂直支则呈"人"字形排列,胞体较内侧隔核大,多呈锥形或椭圆形,多为多极神经元.各组大鼠神经元的数目呈动态变化,Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元数目上升,而去势组减少,替代治疗后1,2周内,Genistein或雌激素替代组与去势组之间差异无显著性(P>0.05);第4周时Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元的数目接近于假手术组水平,与去势组间差异有显著性(P<0.01).结论:去卵巢后行替代治疗能增加大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达,改善大鼠认知功能,可能对中枢神经系统退行性病变起保护作用.