新生小鼠海马源性神经干细胞体外分离培养细胞群的增殖分化

• 作者: 余资江 崔晓萍 应大君 董世武
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 神经系统 细胞培养技术 海马
• 年，卷（期）: 2006,（41）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 1-3,插图41-1
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.41.001

摘要

目的:从新生小鼠脑海马部取材进行大量细胞克隆,对体外分离培养的神经干细胞进行鉴定,检测所分离细胞群的增殖分化特性.方法:实验于2005-07/10在解放军第三军医大学解剖学教研室实验完成.选用清洁级昆明种新生24 h内小鼠12只,利用神经干细胞条件培养基和单细胞克隆技术,从小鼠脑海马分离并体外培养神经干细胞.连续传代20代后,以免疫荧光细胞化学方法及免疫组织化学方法检测克隆细胞Nestin、BrdU、NeuN、NF-200、MOSP及胶质原纤维酸性蛋白的表达.结果:实验选用昆明种新生24 h内小鼠12只,全部进入结果分析.①神经干细胞的培养及分化:神经干细胞以神经球的方式悬浮生长,无明显突起,原代细胞接种后于第3天开始形成神经球.组成细胞球的细胞圆润饱满,活力状态好,绝大多数在1 d内贴壁,并从细胞球边缘伸出突起,加入含血清的培养基后克隆球48 h内即可见到明显的细胞分化,克隆球周围有细胞移出,7 d后原有的细胞球消失.②神经干细胞的鉴定结果:原代克隆及其亚克隆行Nestin免疫荧光染色,证实克隆内细胞均为Nestin抗原阳性;细胞经BrdU标记后,行BrdU免疫细胞化学染色,部分细胞呈阳性.③神经干细胞的分化鉴定:对诱导分化的细胞分别行NeuN、NF-200、MOSP及胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学检测,表达均呈阳性.结论:成功分离并获得新生小鼠脑海马神经干细胞,该细胞可连续传代,具备多向分化潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余资江	贵阳医学院基础医学院解剖学教研室	92	416	9.0	15.0
2	应大君	解放军第三军医大学解剖学教研室	2	8	1.0	2.0
3	崔晓萍	解放军第三军医大学解剖学教研室	1	7	1.0	1.0
4	董世武	解放军第三军医大学解剖学教研室	2	15	2.0	2.0