人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

• 作者: 张大鹏 梁伟雄 温泽淮 王奇 程淑意 陈云波
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病 淀粉样β蛋白 人参皂苷类 NF-κB
• 年，卷（期）: 2006,（23）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 39-42,插1
• 页数: 5页
• 分类号: R2
• 字数: 5785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.23.015

摘要

目的:观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用,并分析其作用机制.方法:实验于2004-03/2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成.①取新生24 h清洁级SD大鼠,无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长.②海马神经元形态及细胞活力观察:细胞培养7 d至分化成熟状态,然后被随机分为3组:人参皂苷Rg1预处理组(分为1,2,4,8,16 μmol/L5个浓度组),首先每加入各浓度的Rg1(中国药品生物制品检定所提供,批号:0703-200221)预作用24 h后,再加入40 μmol/L淀粉样β蛋白25～35共孵育24 h;模型组:每孔加入40 μmol/L淀粉样β蛋白25～35作用24 h;空白组:正常细胞培养用液;每组均为8孔.运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察,四甲基偶氮唑盐比色法法检测细胞活力,即吸光度(A值),该值越高说明细胞活力越强.③检测核因子κB活性:调整细胞悬液密度为2×108 L-1,接种于6孔板(内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片),1 mL/孔.随机分为5组(3孔/组):正常组,模型组,2,4,8 μmol/L人参皂甙Rg1预处理组.细胞培养7 d后,2,4,8 μmol/L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2,4,8 μmol/L的人参皂甙Rgl预作用24 h后,与模型组一起加40 μmol/L淀粉样β蛋白,作用24h.激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度,以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值,比值越高说明核因子κB活性越高.④计量结果差异比较采用单因素方差分析.结果:①神经元细胞形态:相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻,但较正常组严重.②海马神经元细胞活力:正常组和2,4μmol/L人参皂甙Rgl预处理组明显高于模型组(P＜0.05),以4 μmoL/L人参皂甙Rg1预处理组最高;1,8,16 μmol/L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组,但差异不明显(P＞0.05).③神经元细胞核因子κB活性:正常组和2,4,8 μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组(P＜0.01),以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高;4,8 μmol/L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组(P＜0.01).结论:人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25～35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用,尤以4 μmol/L人参皂甙Rg1作用效果最明显.核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一.