小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性和相关基因的表达

• 作者: 孙艳 山爱景 沈伟哉 郭国庆
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞/细胞学 细胞分化 脑/胚胎学 细胞,培养的 流式细胞术 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 19-21
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.05.013

摘要

目的:观察小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性并检测其相关基因的表达.方法:实验于2005-02/06在暨南大学医学院中心实验室进行.①取妊娠13.5 d昆明小鼠分离胚胎大脑中的神经干细胞,用添加碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行体外培养,取培养3 d的神经球接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶,用含血清的培养基诱导分化.②免疫细胞化学检测细胞表面抗原.③四甲基偶氮唑盐法绘制生长曲线.④流式细胞术检测细胞周期.⑤反转录-聚合酶链反应和免疫细胞化学技术对神经干细胞进行鉴定.结果:①胚胎神经干细胞及其分化细胞的抗原表达:血清诱导8 h,分化细胞中(8.9±5.6)%细胞呈Tubulin阳性,(87.5±7.4)%细胞胞浆呈胶质纤维酸性蛋白阳性表达.未诱导细胞近100%呈巢蛋白阳性,仅有极少数细胞Tubulin阳性或胶质纤维酸性蛋白阳性.②胚胎神经干细胞的细胞周期:从小鼠胚胎大脑获取的神经干细胞3 d左右进入指数生长期;原代培养细胞83.8%处于静止期/DNA合成前期.③原代与传代细胞均表达巢蛋白mRNA,聚集形成的神经球巢蛋白阳性.血清诱导4 h胚胎神经干细胞开始转录神经元相关基因Tau和胶质细胞相关基因胶质纤维酸性蛋白.结论:从小鼠胚胎大脑可成功分离获得大量胚胎神经干细胞,并在含碱性成纤维细胞生长因子的条件培养基中迅速增殖,血清诱导下分化生成神经元和星型胶质细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈伟哉	暨南大学医学院解剖教研室	101	835	17.0	24.0
2	郭国庆	暨南大学医学院解剖教研室	102	572	13.0	20.0
3	孙艳	暨南大学血液病研究所	8	23	3.0	4.0
4	山爱景	暨南大学医学院解剖教研室	3	6	2.0	2.0