人白血病细胞株重组激活基因表达及T细胞受体基因重排的检测

• 作者: 王小宁 罗微 邹红云 马骊
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: DNA/遗传学 基因重排 白血病
• 年，卷（期）: 2006,（25）
• 所属期刊栏目: 干细胞研究
• 页码范围: 173-177
• 页数: 5页
• 分类号: R733.7
• 字数: 1468字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.25.021

摘要

背景:淋巴细胞特异性重组激活基因编码的重组激活基因1与重组激活基因2蛋白是参与V(D)J重排机制的重要的重组酶.除参与V(D)J重排以外,近年的研究结果表明重组激活基因介导的转位作用可能与染色体易位及淋巴性恶性肿瘤的发生有关,但迄今尚未有明确定论.目的:检测重组激活基因、DNA修复因子Ku70/Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴瘤细胞株的发生情况.设计:重复测量实验.单位:南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所.材料:T淋巴白血病细胞株Jurkat和6T-CEM购自上海细胞生物研究所;T淋巴白血病细胞株Molt-4,皮肤T细胞淋巴瘤细胞株HuT 102,Burkitt's淋巴瘤细胞株Raji和Daudi以及原髓细胞白血病细胞株HL-60和慢性髓原白血病细胞株K562均由本实验室保存.细胞用含有体积分数0.1胎牛血清的RPMI 1640培养基于37℃,体积分数0.05 CO2条件下培养.方法:实验于2005-10/2006-01在南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所完成.采用反转录聚合酶链反应检测重组激活基因1,重组激活基因2,非同源末端连接装置途径中的DNA修复因子Ku70/Ku80,以及末端脱氧核苷转移酶mRNA表达;采用巢式、半巢式聚合酶链反应、连接介导的聚合酶链反应等方法检测T细胞受体重排删除DNA环和T细胞受体β链重组信号序列两端的断裂点.了解参与V(D)J重排过程的基因表达和T细胞受体基因重排中间体的产生情况.主要观察指标:重组激活基因、DNA修复因子Ku70/Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴瘤细胞株的发生情况.结果:反转录聚合酶链反应检测结果显示:重组激活基因1 mRNA在4种T细胞株中均被检测到,在两种B细胞株和两种髓性白血病细胞株中未检测到;重组激活基因2和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达仅在Jurkat,Molt-4和6T-CEM 3种T细胞株中检测到,但在6T-CEM表达较弱;除HL-60细胞未检测到Ku80表达外,所有细胞株均检测到Ku70和Ku80表达.对4种T细胞株T细胞受体重排中间体检测结果表明:仅在Jurkat细胞中检测到Dβ2-Jβ2 sjTRECs与Dβ2 5'端和3'RSS断点,表明Jurkat细胞发生T细胞受体基因重排.同时发现Jurkat TCRDβ2-Jβ2重排删除环结合区具有明显的多样性特征.结论:重组激活基因可能与T细胞白血病具有更为密切的关系.Jurkat细胞有可能成为研究重组激活基因与T细胞淋巴性肿瘤的一个潜在的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马骊	南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所	55	232	8.0	13.0
2	王小宁	华南理工大学生物科学与工程学院	49	290	10.0	14.0
3	罗微	南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所	25	80	5.0	8.0
4	邹红云	南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所	6	37	3.0	6.0