摘要:
背景:血管内皮生长因子家族及其受体在血管生成和新血管形成过程中具有重要作用.近来,有关血管内皮生长因子家族对血液发生的作用受到广泛关注.目的:观察血管内皮生长因子A、血管内皮生长因子C及其受体和angiopoietin-1(ang-1)、angiopoietin-2(ang-2)及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的表达,以了解血管内皮生长因子和angiopoietin家族在血液发生过程中的作用.设计:单一样本观察. 单位:潍坊医学院,形态实验中心和解剖学教研室.对象:实验于2002-02/2004-08在潍坊医学院进行,收集流产的47例孕妇的受精龄第3~12周人胚胎标本,孕妇知情同意.方法:标本连续切片,每隔10张抽出2张切片,分别做苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色.多克隆抗血管内皮生长因子C,fms样酪氨酸激酶,flt-4,ang-1,ang-2,Tie-2抗体以及单克隆抗血管内皮生长因子A,胎肝激酶1抗体4℃孵育过夜,羊抗鼠IgG及SABC液室温下分别孵育2 h,DAB显色.分别以正常兔或鼠血清代替一抗作阴性对照.光学显微镜下观察、拍照.主要观察指标:①血管内皮生长因子A和血管内皮生长因子C及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达.②ang-1和ang-2及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达.结果:①第21~25天人胚卵黄囊血岛血管内皮细胞和造血细胞强表达血管内皮生长因子A及其受体fms样酪氨酸激酶和胎肝激酶1、血管内皮生长因子C及其受体胎肝激酶4、ang-2及其受体Tie-2蛋白,弱表达ang-1蛋白.②背主动脉和中肾于发育第4周开始表达上述各种因子及其受体,免疫阳性反应物集中在大而圆、有核的造血细胞.阳性细胞的数量到第7周到达高峰.8周以后,阳性细胞数量显著减少,到12周,几乎所有的血细胞为免疫阴性反应.③生殖腺主要在第6~8周表达血管内皮生长因子A,fms样酪氨酸激酶,flt-4,ang-1,ang-2和Tie-2蛋白,但不表达血管内皮生长因子C和胎肝激酶1.④主动脉-生殖腺-中肾区的血管内皮细胞未检测到上述各因子的表达.结论:人胚卵黄囊血岛造血细胞和内皮细胞以及背主动脉和中肾共表达多种与血管发生和血液发生相关的因子.人胚内造血发生于第4周.