马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

• 作者: 乔军 孟庆玲 张艳 才学鹏 景志忠 贾桂珍
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 马鹿布氏杆菌 25kDa外膜蛋白基因 克隆 序列分析 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 128-131,135
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3288字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.02.007

摘要

目的 克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达.方法 运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达.结果 该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽.在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点.与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间.转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%.结论 马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	景志忠	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	81	458	12.0	18.0
2	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	141	790	15.0	21.0
3	贾桂珍	塔里木农垦大学动物科技学院	12	91	6.0	9.0
4	孟庆玲	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	12	60	4.0	7.0
5	乔军	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	20	427	8.0	20.0
6	张艳	甘肃农业大学动物医学院	1	6	1.0	1.0