Ku80表达抑制细胞模型的建立及其功能检测

• 作者: 于世英 冷彦 庄亮 李小兰 熊华 熊慧华 黄晓园
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ku80 RNA干扰 稳定转染 放射敏感性 细胞周期
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 447-450
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 4026字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2007.05.010

摘要

目的 建立利用RNAi技术抑制Ku80表达的HeLa细胞模型,探讨Ku80在放射生物学方面的功能.方法 构建靶向抑制Ku80的siRNA表达质粒,转染HeLa细胞,筛选稳定表达的转化克隆;Western blotting检测Ku80表达变化;6 MV X线照射6 Gy后,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;克隆形成实验检测细胞SF2、D0等值.结果 构建的质粒转染HeLa细胞获得3个稳定转染克隆,Western blotting分析表明2个阳性克隆Ku80蛋白抑制率分别达到89.3%和96.4%;Ku80表达抑制细胞受X线照射后48及72 h的凋亡率高于对照细胞(P＜0.05),但4株细胞的细胞周期变化无统计学意义(P＞0.05);2个阳性克隆细胞株的D0和SF2值明显降低,在D10剂量时的增敏比分别为1.315和1.365.结论 运用RNAi技术建立的Ku80表达抑制克隆细胞可以成为简单实用的细胞模型;Ku80-siRNA可以抑制Ku80的表达,从而促进HeLa细胞对X线的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于世英	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	259	1644	21.0	31.0
2	熊慧华	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	44	290	8.0	15.0
3	庄亮	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	37	253	8.0	14.0
4	黄晓园	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	16	133	6.0	11.0
5	李小兰	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	27	116	6.0	8.0
6	熊华	华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心	28	167	8.0	10.0