霍乱毒素B亚单位与p277融合基因在大肠杆菌中表达及免疫分析

• 作者: 刘景晶 吴洁 曹荣月 李建平 熊祺琰 陈庆梅
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 霍乱毒素B亚单位 多肽p277 纯化 包含体 免疫分析 神经节苷脂GM1
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 157-163
• 页数: 7页
• 分类号: Q7
• 字数: 5900字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2007.03.001

摘要

为了增强多肽表位的免疫原性,构建了霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)和p277的融合基因CTB-p277,将该融合基因克隆到pET28a(+)中,获得原核表达载体pET28a-CTB-p277;并将该质粒转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中;重组菌株经2%的乳糖诱导5 h后的表达产物用12%的SDS-PAGE分析表明可以表达融合蛋白,融合蛋白占全菌蛋白约40%,且主要以包含体的形式存在.包含体经洗涤、裂解,用DEAE纤维素离子交换纯化,可以获得99.1%的重组蛋白.重组蛋白的包含体经复性后,在体外可以自组装成五聚体.重组蛋白免疫KK-Ay小鼠后,ELISA的分析表明可以产生抗p277的抗体.血糖和体重的测定结果显示,给药组小鼠的血糖有明显的降低,体重也有相应的减轻.同时GM1-ELISA的检测表明,CTB-p277在体外可以和神经节苷脂GM1(Monosialoganglioside)特异结合,具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘景晶	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	116	553	12.0	18.0
2	曹荣月	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	61	129	6.0	8.0
3	吴洁	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	53	285	6.0	16.0
4	陈庆梅	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	3	13	2.0	3.0
5	熊祺琰	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	6	7	1.0	2.0
6	李建平	中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室	1	6	1.0	1.0