重组人PPARα基因载体phPPARα-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系的建立

• 作者: 万敬员 刘颖菊 周元国 周岐新 杨俊卿 章涛
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体 转染 真核表达 293细胞
• 年，卷（期）: 2007,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2073-2077
• 页数: 5页
• 分类号: R966
• 字数: 3159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.17.007

摘要

目的 建立体外phPPARα-IRES2-EGFP质粒高效转染并获得重组基因hPPARα高效表达的体系.方法 采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将phPPARα-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基因表达强度及转染效率,并对转染细胞hPPARα的表达进行荧光定量PCR和Western Blot检测.结果 荧光显微镜下可见转染phPPARα-IRES2-EGFP的293细胞GFP报告基因高表达,转染效率高达(83±9)%;并且,其hPPARα mRNA表达水平高于空载体转染对照组3个数量级,hPPARα蛋白表达也远高于对照组(P＜0.01),说明导入的重组质粒能够高效表达bPPARα.结论 成功建立重组质粒phPPARα-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系,为hPPARα受体功能的研究及基于hPPARα为靶标的药物筛选平台的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万敬员	重庆医科大学药理学教研室	67	331	11.0	14.0
2	周元国	第三军医大学创伤烧伤与复合伤国家重点实验室	66	298	7.0	13.0
3	章涛	重庆医科大学药理学教研室	11	36	3.0	6.0
5	刘颖菊	重庆医科大学药理学教研室	44	324	11.0	16.0
6	杨俊卿	重庆医科大学药理学教研室	118	709	14.0	22.0
7	周岐新	重庆医科大学药理学教研室	190	1564	18.0	29.0