激光显微切割结合蛋白质组学技术分析DDAH-1在肝细胞癌表达的变化

• 作者: 刘淑琴 洪毅 王庆 王红阳 胡和平 艾建华 谈冶雄 陆豪杰
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 激光捕获显微切割 蛋白质组学 差异表达蛋白 二甲基精氨酸二甲胺水解酶1
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 505-510
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7|R730.2
• 字数: 4102字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.06.002

摘要

目的:应用激光显微切割(laser capture microdissection,LCM)结合蛋白组学技术筛查肝细胞癌(hepatocellular carcinoma ,HCC)组织及其癌旁组织的差异表达蛋白,分析二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1,DDAH-1)在肝细胞癌表达的变化. 方法:选取2003-2006年间东方肝胆外科医院原发性肝细胞癌患者的手术切除标本40例.利用LCM技术分离捕获肝癌组织及癌旁组织的肝实质细胞,应用二维凝胶电泳技术(two dimensional gel electrophoresis,2-DE)筛选全部标本共同差异表达频率>80%、差异强度>3倍的蛋白质点;应用电喷雾串联质谱(electrospray ionisation tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对差异蛋白点进行质谱鉴定分析;采用Western blotting及免疫组化对差异蛋白DDAH-1进行检测. 结果:2-DE筛查获得在肝癌及癌旁组织差异表达的蛋白质点共20个,通过质谱鉴定获得12个蛋白质,其中5个在肝癌组织表达上调,7个下调;这12个蛋白质与细胞代谢、增殖、分化及信号调控相关,其中的DDAH-1是参与调控一氧化氮相关通路的重要酶.Western blotting检测显示,20例标本中16例DDAH-1表达明显升高;免疫组化检测证实,10例标本DDAH-1全部呈强阳性表达. 结论:肝细胞癌组织细胞中筛查到12个差异表达蛋白质,其中的DDAH-1在肝癌组织中表达上调,其有可能在肝癌发生、发展过程中起重要作用.