1型和2型外壳蛋白构建的AAV载体携带HIV-1 gag诱导免疫反应的比较研究

• 作者: 余双庆 冯霞 刘新蕾 刘红梅 吴小兵 曾毅 董小岩
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 gag 腺病毒伴随病毒 免疫反应
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 177-182
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9|Q78
• 字数: 3834字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2007.03.003

摘要

比较两种血清型的腺病毒伴随病毒(Adeno-associated virus,AAV)载体携带HIV-1 gag基因肌肉注射诱导小鼠免疫反应的特点.分别制备携带EGFP和HIV-1 gag基因的重组AAV2/1(AAV1)和AAV2载体.小鼠肌肉注射rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP,观察注射局部EGFP的表达.将rAAV1-gag和rAAV2-gag分别以0、3周初免/加强方式肌肉注射免疫BALB/c小鼠以及新西兰白兔.ELISA法检测抗HIV-1 Gag P24蛋白的特异性抗体,细胞内细胞因子染色法检测Gag特异性的CTL反应.结果表明,rAAV1-EGFP在小鼠肌肉的表达强度显著高于rAAV2-EGFP;用Western blot法和间接免疫荧光法检测rAAV1-gag和rAAV2-gag体外转染的293细胞,均可检测到HIV-1 Gag蛋白的表达;在小鼠体内rAAV1-gag和rAAV2-gag组均可检测到特异性P24抗体,抗体滴度rAAV1-gag组显著高于rAAV2-gag组;而无论rAAV1-gag组还是rAAV2-gag组,特异性CTL反应均较低,与阴性对照组相比均无显著性差异;两种载体免疫兔子也都可检测到特异性P24抗体,同样地,rAAV1-gag组显著高于rAAV2-gag组.结论:携带HIV-1 gag基因的rAAV1或rAAV2以肌肉注射方式免疫小鼠主要诱导特异Gag的体液免疫反应;且rAAV1可诱导很强的抗HIV-1 Gag特异性抗体,抗体水平显著高于rAAV2.